Kaninchen anti-Human CD59 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P13987

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: CD59-Funktion und Lokalisierung

• Das CD59-Glykoprotein, auch bekannt als Protectin, MAC-hemmendes Protein (MAC-IP), Membraninhibitor der reaktiven Lyse (MIRL) oder HRF-20, ist ein Schlüsselregulator des Komplementsystems.
• CD59 ist ein potenter Hemmer des Komplement-Membranangriffskomplexes (MAC) und schützt menschliche Zellen vor komplementvermittelter Lyse. Es bindet an die Beta-Haarschleifen von C8 (C8A und C8B) im sich zusammenbauenden MAC und bildet ein intermolekulares Beta-Faltblatt, das die Einbindung mehrerer Kopien von C9 verhindert, die für die vollständige Bildung der osmotischen Pore erforderlich sind. Verwandte Referenzen: PMID:11882685, PMID:1698710, PMID:2475111, PMID:36797260
• Die lösliche Form von CD59, die im Urin gefunden wird, behält eine spezifische Komplementbindungsaktivität bei, zeigt aber eine stark reduzierte Fähigkeit, die MAC-Zusammenbau auf Zellmembranen zu hemmen.
• CD59 ist primär über einen Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-Anker an der Zellmembran lokalisiert, kann aber auch sezerniert werden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Glykierung, die zur strukturellen Stabilität und Funktion beitragen.
• Mutationen in CD59 sind mit erblicher hämolytischer Anämie assoziiert.
• Alternatives Spleißen des CD59-Gens erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen extrazellulären Region von CD59 (aa 26–101), die an der Zelloberfläche exponiert ist; das -Konjugat eignet sich für den direkten Nachweis von nativem CD59 in der Durchflusszytometrie ohne einen Sekundärantikörper.
• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp zu bestimmen; überschüssiger Antikörper kann den Hintergrund erhöhen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Vitalitätsfarbstoffe, um eine spezifische Membranfärbung von unspezifischer Bindung an tote Zellen zu unterscheiden.
• Die CD59-Expression kann je nach Zelltyp und Aktivierungszustand variieren; validieren Sie die Färbung im relevanten biologischen System (z. B. periphere Blutmononukleäre Zellen, Tumorzelllinien) und erwägen Sie eine Co-Färbung mit anderen komplementregulatorischen Markern.

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