Kaninchen anti-Mensch CD55 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P08174

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD55 (Complement Decay-Accelerating Factor)

• CD55, auch bekannt als Decay-Accelerating Factor (DAF), ist ein Glycophosphatidylinositol (GPI)-verankertes Membranprotein, das zur Familie der Regulatoren der Komplementaktivierung (RCA) gehört.
• Es erkennt C4b- und C3b-Fragmente, die auf Zelloberflächen abgelagert werden, und beeinträchtigt ihre Fähigkeit, die Umwandlung von C2 und Faktor B zu katalysieren. Dadurch verhindert es die Bildung der Amplifizierungskonvertasen C4b2a und C3bBb. Verwandte Referenzen: PMID:7525274
• Durch Destabilisierung und Hemmung der Assemblierung von C3- und C5-Konvertasen schützt CD55 autologe Zellen vor komplementvermittelter Lyse und Gewebeschäden. Verwandte Referenzen: PMID:28657829
• Über die Komplementregulation hinaus dient CD55 als zellulärer Rezeptor für verschiedene Picornaviren, darunter Coxsackievirus A21, Coxsackieviren B1, B3, B5, humanes Enterovirus 70 und D68 sowie Echoviren 6, 7, 11, 12, 20 und 21.
• Es wird auf der Plasmamembran praktisch aller Zellen exprimiert, die mit Plasmakomplementproteinen in Kontakt kommen, sowie auf Epithelzellen, die extrazelluläre Kompartimente auskleiden; lösliche Formen finden sich auch in Körperflüssigkeiten und der extrazellulären Matrix.
• Das Protein enthält mehrere N-verknüpfte Glykosylierungsstellen und vier N-terminale Sushi (CCP)-Domänen, die für die Ligandenbindung essenziell sind; alternatives Spleißen erzeugt GPI-verankerte und sezernierte Varianten.
• Klinisch sind Mutationen in CD55 mit dem CHAPLE-Syndrom (Komplementhyperaktivierung, angiopathische Thrombose und proteinverlierende Enteropathie) verbunden, und das Molekül trägt die Cromer-Blutgruppenantigene.
• Das reife Polypeptid hat eine vorhergesagte Masse von ~41 kDa, aber umfangreiche Glykosylierung führt im Western Blot zu einem heterogenen Bandenmuster im Bereich von 39 kDa bis 59 kDa.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die gesamte extrazelluläre Domäne (Aa 35–353) ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper natives CD55 auf lebenden Zellen bindet; validieren Sie die Färbung unter nicht permeabilisierenden Bedingungen für den Oberflächennachweis.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper im Bereich von 0,1–5 µg/mL mit humanen mononukleären Zellen aus dem peripheren Blut oder CD55-transfizierten Zelllinien, um die optimale Konzentration zu bestimmen.
• Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierungsreagenzien, um unspezifische Bindung zu minimieren, insbesondere in Proben mit hoher FcγR-Expression.
• Da CD55 von der Membran abgelöst wird, sollten Sie bei der Untersuchung löslicher Formen sowohl Primärzellen als auch passende Überstände färben.
• Überprüfen Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System; der Antikörper reagiert nachweislich mit humanem CD55, aber die Leistung in nicht-menschlichen Primaten oder Nagermodellen muss individuell bestätigt werden.

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