Kaninchen-anti-Mensch CD52 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie – P31358

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD52

• CD52, auch bekannt als CAMPATH-1-Antigen, HE5 oder CDW52, ist ein sehr kleines GPI-verankertes Glykoprotein mit einem reifen Peptid von nur 12 Aminosäuren nach Spaltung des Signalpeptids und GPI-Anbindung.
• Als GPI-verankertes Membranprotein lokalisiert CD52 zur Zellmembran und wird über einen Glykosylphosphatidylinositol-(GPI-)Anker gebunden, es fehlt eine Transmembrandomäne.
• Es wird hoch exprimiert auf Lymphozyten, Monozyten und anderen Immunzellen, findet sich aber auch im männlichen Genitaltrakt als epididymales sekretorisches Protein E5 (HE5).
• CD52 ist stark glykosyliert; der GPI-Anker und das N-verknüpfte Glykan tragen zu seiner Rolle bei der Kohlenhydratpräsentation bei und orientieren möglicherweise Kohlenhydrate an der Zelloberfläche für Zell-Zell-Interaktionen.
• Obwohl seine genaue Funktion noch unklar ist, kann CD52 eine Rolle bei der Aufnahme und Orientierung von Kohlenhydratanteilen an der Zelloberfläche spielen und möglicherweise an der Immunregulation beteiligt sein.
• Das CD52-Antigen hat ein Molekulargewicht von ~6,6 kDa (berechnet aus der Aminosäuresequenz), wandert aber aufgrund der Glykosylierung oft höher; dieser Antikörper targetiert die N-terminale Region (1-61).
• CD52 ist das Target des therapeutischen monoklonalen Antikörpers Alemtuzumab (Campath-1H), der zur Behandlung der chronischen lymphatischen Leukämie und Multiplen Sklerose eingesetzt wird.
• Schlüsselwörter aus UniProt lauten: 3D-Struktur, Zellmembran, Glykoprotein, GPI-Anker, Lipoprotein, Membran, Referenzproteom, Signal.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser -konjugierte Antikörper ist geeignet für die direkte Durchflusszytometrie an lebenden menschlichen Zellen. Validieren Sie die Färbebedingungen (Antikörperkonzentration, Inkubationszeit, Temperatur) in Ihrem spezifischen Assaysystem.
• CD52 ist ein Oberflächenantigen; vermeiden Sie Permeabilisierungsschritte, die den GPI-Anker stören könnten. Verwenden Sie schonende Zellhandhabung und Standardprotokolle für Oberflächenfärbungen.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären N-terminalen Region (Aminosäuren 1-61), was die Erkennung der reifen Form an der Zelloberfläche gewährleistet.
• Eine starke Expression wird auf peripheren Blutlymphozyten und Monozyten erwartet; verwenden Sie gesunde Spender-PBMC als Positivkontrolle.
• Für die quantitative Durchflusszytometrie schließen Sie geeignete Isotypkontrollen ein und führen Sie eine Titration durch, um die optimale Antikörperkonzentration zu bestimmen.
• Aufgrund der geringen Größe und GPI-Verbindung kann CD52 von der Zelloberfläche abgelöst werden; für eine optimale Detektion wird eine sofortige Verarbeitung frischer Proben empfohlen.

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