Kaninchen-anti-human-CD50(ICAM-3)-monoklonaler Antikörper für FC – P32942

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD50/ICAM-3

• CD50 (ICAM-3, interzelluläres Adhäsionsmolekül 3) ist ein stark glykosyliertes Transmembranprotein vom Typ I, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört und als wichtiges Zelladhäsionsmolekül auf ruhenden Leukozyten fungiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:1448173, PMID:1448174, PMID:23775590

• Es fungiert als primärer Ligand für das Integrin LFA-1 (ITGAL/ITGB2) und vermittelt interzelluläre Adhäsionsprozesse, die für die Immunüberwachung essenziell sind, einschließlich der Phagozytose apoptotischer neutrophiler Granulozyten durch Makrophagen.
  Verwandte Referenzen: PMID:1448173, PMID:1448174, PMID:23775590

• ICAM-3 interagiert außerdem mit dem Integrin ITGAD/ITGB2, wodurch seine Rolle bei der Leukozytenadhäsion und -migration weiter ausgeweitet wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:8777714

• Auf dendritischen Zellen (DCs) bindet ICAM-3 in calciumabhängiger Weise an das C-Typ-Lektin CD209 (DC-SIGN), stellt den ersten Kontakt mit ruhenden T-Zellen her und fördert die T-Zell-Proliferation.
  Verwandte Referenzen: PMID:10721994

• CD50 wird konstitutiv ausschließlich auf ruhenden Leukozyten (einschließlich Lymphozyten, Monozyten und neutrophilen Granulozyten) exprimiert, fehlt jedoch auf ruhenden oder zytokinaktivierten Endothelzellen.

• Das Protein enthält in seiner extrazellulären Region fünf Immunglobulin-ähnliche C2-Typ-Domänen und durchläuft posttranslationale Modifikationen wie N-Glykosylierung und Phosphorylierung, die seine adhäsiven Funktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 30–114) entspricht der extrazellulären N-terminalen Domäne, die auf lebenden Zellen zugänglich ist; für eine optimale Erkennung in der Durchflusszytometrie sollte eine Färbung unfixierter Leukozyten in Betracht gezogen werden.
• Führen Sie ein Titrationsexperiment durch, um die optimale Antikörperkonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Assaybedingungen zu bestimmen, da die Markierungsintensität zwischen verschiedenen Leukozytensubpopulationen variieren kann.
• Verwenden Sie einen geeigneten, mit konjugierten Isotyp-Kontrollantikörper, um eine unspezifische Bindung zu beurteilen und Schwellenwerte für das Gating festzulegen.
• Validieren Sie bei Fixierungs- und Permeabilisierungsschritten, dass das von diesem Antikörper erkannte Epitop erhalten bleibt, da die extrazelluläre Domäne gegenüber bestimmten Behandlungen empfindlich sein kann.
• Dieses Produkt ist für die Durchflusszytometrie validiert; andere Anwendungen können eine zusätzliche Optimierung erfordern.

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