Kaninchen anti-human CD370/CLEC9A monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - Q6UXN8

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD370/CLEC9A Funktion und Lokalisierung

• Proteinidentität und Aliasse: CD370, auch bekannt als C-Typ-Lektin-Domänen-Familie 9 Mitglied A (CLEC9A), DNGR-1 und UNQ9341, wird durch das CLEC9A-Gen beim Menschen kodiert.
• Kernfunktion als endozytischer Rezeptor: CLEC9A fungiert als endozytischer Rezeptor auf einer kleinen Untergruppe myeloider Zellen, der spezialisiert ist für die Aufnahme und Verarbeitung von Material aus toten Zellen. Es vermittelt die Kreuzpräsentation von Antigenen aus toten Zellen auf Syk-abhängige Weise.
• Ligandenerkennungsmechanismus: Der Rezeptor erkennt die filamentöse Form von Aktin (F-Aktin) in Verbindung mit bestimmten Aktin-bindenden Domänen von Zytoskelettproteinen, einschließlich Spektrin, die bei Zellmembranschäden freigelegt werden.
• Gewebe- und zelluläre Expression: Seine Expression ist im peripheren Blut stark eingeschränkt auf die Oberfläche von BDCA3+ dendritischen Zellen und auf eine kleine Untergruppe von CD14+ und CD16− Monozyten.
• Subzelluläre Lokalisierung: CLEC9A ist ein Membranprotein, was mit seiner Rolle als Zelloberflächenrezeptor übereinstimmt. Es enthält eine Einzel-Pass-Transmembranhelix und eine Signalanker-Sequenz, wodurch es als Typ-II-Membranprotein klassifiziert wird.
• Strukturelle und funktionelle Merkmale: Das Protein gehört zur Familie der C-Typ-Lektine und enthält Disulfidbrücken und N-gebundene Glykosylierungsstellen, charakteristisch für Membranrezeptoren, die an der Endozytose beteiligt sind. Sein Molekulargewicht beträgt etwa 27 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 110–241 der extrazellulären Domäne (NP_997228.1), die die Kohlenhydrat-Erkennungsdomäne enthält. Diese Region ist wahrscheinlich auf lebenden Zellen zugänglich, was seine Verwendung in der Durchflusszytometrie unterstützt.
• Für die Durchflusszytometrie titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp zu bestimmen. Schließen Sie eine geeignete -Isotypenkontrolle ein und ziehen Sie die Verwendung eines Fc-Rezeptor-Blockierreagenz in Betracht, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Da CLEC9A ein endozytischer Rezeptor ist, kann die Bindung des Antikörpers eine Internalisierung auslösen. Um eine potenzielle Internalisierung zu minimieren, führen Sie die Färbeschritte nach Möglichkeit bei 4°C in Gegenwart von Natriumazid durch.
• Validieren Sie den Antikörper an einer bekannten positiven Probe, wie z.B. BDCA3+ dendritischen Zellen oder CD14+ Monozyten, um die Spezifität zu bestätigen. Das eingeschränkte Expressionsmuster macht es zu einem nützlichen Marker für Immunphänotypisierungsstudien.

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