Kaninchen anti-Mensch CD337/NKp30 monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FC (intrazellulär) - O14931

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD337/NKp30

• Das Protein natürlicher Zytotoxizität-auslösender Rezeptor 3 (NCR3), auch bekannt als NKp30 oder CD337, ist ein Rezeptor auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen), der zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Aufgrund von alternativem Spleißen existiert er in mehreren Isoformen, was zu Proteinmassen zwischen etwa 16 und 21 kDa (beobachtet) bei einer theoretischen Molekularmasse von etwa 21,6 kDa führt.
• NCR3 fungiert als aktivierender Rezeptor auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) und stimuliert die Zytotoxizität bei Bindung an extrazelluläre Liganden wie BAG6 und NCR3LG1.
• Die Bindung von NCR3 durch BAG6 fördert die Reifung myeloischer dendritischer Zellen (DC), sowohl durch die Abtötung unreifer DC als auch durch die Induktion von NK-Zellen zur Freisetzung von TNF-α und IFN-γ, die wiederum die DC-Reifung antreiben.
• Der Rezeptor wird selektiv von allen ruhenden und aktivierten NK-Zellen exprimiert; eine schwache Expression wurde auch in der Milz nachgewiesen.
• Subzellulär lokalisiert sich NCR3 an der Zellmembran, was seiner Rolle als Transmembranrezeptor entspricht.
• Das Protein weist eine Immunglobulindomäne, ein Signalpeptid, eine Transmembranhelix und Disulfidbindungen auf; es ist zudem glykosyliert. Schlüsselwörter aus UniProt umfassen alternatives Spleißen, Glykoprotein und Immunität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 19-135) entspricht, kann der Antikörper oberflächenexprimiertes NCR3 auch ohne Permeabilisierung nachweisen. Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie ist eine Permeabilisierung erforderlich; optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für NK-Zelllinien.
• Der beobachtete Bereich der Proteinmasse (16–21 kDa) deutet auf mehrere Isoformen oder posttranslationale Modifikationen hin; validieren Sie die Spezifität in Ihrem Zellsystem mit geeigneten Kontrollen.
• Da NCR3 selektiv auf NK-Zellen exprimiert wird, schließen Sie Kontrollzelltypen (z. B. T-Zellen) ein, um die Spezifität in IF/ICC-Experimenten zu bestätigen.
• Für IF/ICC testen Sie einen Bereich von Antikörperverdünnungen an paraformaldehydfixierten Zellen; eine Antigenreaktivierung kann das Signal verbessern, wenn eine Epitopmaskierung vermutet wird.

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