Kaninchen-anti-human-CD337/NKp30-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – O14931

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD337/NKp30

• CD337, auch als NKp30 oder NCR3 bekannt, ist ein Rezeptor 3, der die natürliche Zytotoxizität auslöst und auf natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) exprimiert wird. Es handelt sich um ein Typ-I-Transmembranprotein mit einer einzelnen immunglobulinähnlichen Domäne in seiner extrazellulären Region.
• NKp30 spielt eine entscheidende Rolle bei der durch NK-Zellen vermittelten Zytotoxizität. Nach der Ligandenbindung stimuliert es NK-Zellen, Zielzellen, einschließlich Tumorzellen, durch die Freisetzung zytotoxischer Granula abzutöten.
• Zu den bekannten Liganden von NKp30 gehören BAG6 (HLA-B-assoziiertes Transkript 3) und NCR3LG1 (B7-H6). Die Bindung von BAG6 löst nicht nur die NK-Zytotoxizität aus, sondern fördert über von NK-Zellen stammende Zytokine auch die Reifung myeloider dendritischer Zellen (DCs).
• Das Protein liegt aufgrund alternativen Spleißens in mehreren Isoformen vor, die möglicherweise die Rezeptorfunktion und Signalübertragung modulieren.
• Auf subzellulärer Ebene ist NKp30 in der Zellmembran lokalisiert, was seiner Funktion als Zelloberflächenrezeptor entspricht.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die N-Glykosylierung und die Bildung von Disulfidbrücken, die für die korrekte Faltung und Ligandenerkennung wichtig sind.
• NKp30 wird selektiv auf ruhenden und aktivierten NK-Zellen exprimiert; in der Milz wird eine sehr geringe Expression nachgewiesen.
• Als Mitglied der Immunglobulinsuperfamilie enthält NKp30 ein Signalpeptid, eine extrazelluläre immunglobulinähnliche Domäne, eine Transmembranhelix und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz. Ihm fehlen intrinsische Signalmotive, es assoziiert jedoch mit Adaptermolekülen wie CD3ζ und FcεRIγ, um Aktivierungssignale weiterzuleiten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 19–135) des humanen NKp30, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich ein auf der Zelloberfläche zugängliches Epitop erkennt.
• Dieses -Konjugat ist für den direkten immunfluoreszenzbasierten Nachweis in der Durchflusszytometrie konzipiert. Für eine optimale Färbung sollte eine Antikörpertitration mit einer geeigneten Zelllinie (z. B. NK92) oder primären humanen NK-Zellen durchgeführt werden.
• Bei der Verwendung dieses Antikörpers in Multiparameter-Panels sollten geeignete Kompensationskontrollen eingeschlossen werden, da spektrale Überschneidungen mit anderen Fluorophoren aufweisen kann.
• Aufgrund des vorhergesagten niedrigen Molekulargewichts (~21 kDa) und einer möglichen Glykosylierung kann das Protein im Western Blot als diffuse Bande erscheinen; die Eignung seines Ausgangsklons für WB muss jedoch unabhängig überprüft werden.

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