Kaninchen anti-Human CD335/NKp46 monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FACS - O76036

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Natural Cytotoxicity Triggering Receptor 1 (CD335/NKp46)

• Das Protein ist ein Natural Cytotoxicity Triggering Receptor (NCR1), auch bekannt als CD335, LY94 oder NKp46. Es gehört zur Immunglobulin-Superfamilie und existiert in mehreren Isoformen durch alternatives Spleißen.
• Es fungiert als zytotoxizitätsaktivierender Rezeptor, der die Fähigkeit aktivierter natürlicher Killerzellen (NK-Zellen) verbessert, Tumorzellen zu lysieren.
• CD335/NKp46 wird selektiv sowohl auf ruhenden als auch auf aktivierten NK-Zellen exprimiert und dient als spezifischer Marker für die Identifizierung von NK-Zellen.
• Der Rezeptor ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein, das auf der Zellmembran lokalisiert ist, mit einer extrazellulären Region, die zwei immunglobulinähnliche Domänen enthält.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die zur strukturellen Stabilität beitragen.
• Das Gen NCR1 ist auf dem menschlichen Chromosom 19 lokalisiert und kodiert für ein Protein mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von ca. 34,5 kDa, wobei beobachtete Bänder aufgrund der Glykosylierung variieren können (Bereich 21-34 kDa).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (aa 22-254) von humanem CD335/NKp46, die auf der Zelloberfläche exponiert ist; dieses Design eignet sich zum Nachweis des nativen Rezeptors.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie azetonfixierte oder paraformaldehydefixierte Zellpräparationen in Betracht ziehen und eine Negativkontrolle ohne primären Antikörper einschließen, um den Hintergrund zu bewerten.
• Für die Durchflusszytometrie (FACS) eliminiert die direkte Konjugation mit die Notwendigkeit eines sekundären Antikörpers; stellen Sie sicher, dass das Fluorophor mit den Laser- und Filterkonfigurationen Ihres Instruments kompatibel ist (Anregung/Emission ähnlich wie bei Alexa Fluor 594).
• Exprimierende Zellen oder NK-Zelllinien sollten als Positivkontrollen verwendet werden; frisch isolierte humane PBMCs können als Quelle endogener CD335/NKp46-exprimierender NK-Zellen dienen.
• Aufgrund der Glykosylierungsheterogenität können im Western Blot mehrere Bänder auftreten; wenn ein WB versucht wird, beachten Sie, dass das Epitop durch reduzierende und Kochbedingungen denaturiert werden kann.

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