Kaninchen-anti-human-CD33-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P20138

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD33

• Das myeloide Zelloberflächenantigen CD33 (Siglec-3, gp67) ist ein Typ-I-Transmembranprotein mit einmaliger Transmembrandomäne und gehört zur Familie der sialinsäurebindenden, immunglobulinähnlichen Lektine (Siglec) (UniProt P20138).
• CD33 fungiert als sialinsäurebindender Rezeptor, der bevorzugt Glykane mit α2,3- und α2,6-verknüpfter Sialinsäure erkennt (PubMed:7718872). Zugehörige Referenzen: PMID:7718872
• Die zytoplasmatische Domäne enthält zwei immunrezeptor-tyrosinbasierte inhibitorische Motive (ITIMs); nach der Bindung von Liganden wie C1q oder sialylierten Glykoproteinen werden die ITIMs durch Src-ähnliche Kinasen (z. B. LCK) phosphoryliert (PubMed:10887109, PubMed:28325905). Zugehörige Referenzen: PMID:10887109 , PMID:28325905
• Phosphorylierte ITIMs rekrutieren die Protein-Tyrosin-Phosphatasen PTPN6/SHP-1 und PTPN11/SHP-2, die nachgeschaltete Signalmoleküle dephosphorylieren und dadurch Immunzellen in einem Ruhezustand halten (PubMed:10206955, PubMed:10556798, PubMed:10887109). Zugehörige Referenzen: PMID:10206955 , PMID:10556798 , PMID:10887109
• Die durch CD33 vermittelte Repression in Monozyten erfordert ebenfalls die Aktivität der Phosphoinositid-3-Kinase/PI3K (PubMed:15597323). Zugehörige Referenzen: PMID:15597323
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Plasmamembran und Peroxisomen; die Gewebeexpression findet hauptsächlich in Zellen der monozytären/myeloiden Linie sowie in Mikroglia des Gehirns statt.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung und Phosphorylierung (UniProt-Schlüsselwörter).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 18–259) des humanen CD33; daher kann der Antikörper möglicherweise die native Konformation des Oberflächenantigens erkennen und dürfte für Anwendungen in der Durchflusszytometrie geeignet sein.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Konzentration für das jeweilige Zellsystem zu bestimmen (z. B. humane PBMCs oder myeloide Zelllinien).
• Validieren Sie die Leistung des Antikörpers im relevanten Probentyp und in der vorgesehenen Anwendung, da die Leistung je nach Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokoll variieren kann.

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