Kaninchen anti-Mensch CD33 mAb für FC - P20138

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD33

• CD33, auch bekannt als Siglec-3 (Sialinsäure-bindendes Ig-ähnliches Lektin 3) oder p67, ist ein Transmembranrezeptor der Immunglobulin-Superfamilie und der Siglec-Familie der sialinsäurebindenden Lektine. Es wird hauptsächlich auf Zellen der myeloischen Linie exprimiert.
• CD33 bindet bevorzugt an alpha-2,3- und alpha-2,6-verknüpfte Sialinsäure tragende Glykane, vermittelt Zell-Zell-Interaktionen und hält Immunzellen in einem Ruhezustand. Die Bindung von Liganden löst die Phosphorylierung seiner zytoplasmatischen Immunorezeptor-Tyrosin-basierten inhibitorischen Motive (ITIMs) durch Src-ähnliche Kinasen wie LCK aus, wodurch Dockingstellen für die Protein-Tyrosin-Phosphatasen SHP-1 und SHP-2 entstehen. Diese Phosphatasen dephosphorylieren dann nachgeschaltete Signalmoleküle, um die zelluläre Aktivierung zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:7718872, PMID:10887109, PMID:28325905, PMID:10206955, PMID:10556798, PMID:10611343, PMID:11320212
• Die inhibitorische Funktion von CD33 bei der Monozytenaktivierung erfordert die Aktivität der Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K). Verwandte Referenzen: PMID:15597323
• CD33 ist an der Zellmembran und in Peroxisomen lokalisiert, wie subzelluläre Fraktionierung und Immunfluoreszenzstudien gezeigt haben.
• Das Protein wird überwiegend auf Zellen der monozytären/myeloischen Linie exprimiert; im Gehirn wird es hauptsächlich auf Mikrogliazellen exprimiert, wo es mit neurodegenerativen Erkrankungen in Verbindung gebracht wird.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung von ITIM-Tyrosinresten. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 18-259) von humanem CD33. Diese Region ist auf der Zelloberfläche exponiert, sodass er für die Durchflusszytometrie an lebenden Zellen ohne Permeabilisierung geeignet ist.
• ist ein grün fluoreszierender Farbstoff mit Anregungs-/Emissionsmaxima von ca. 491/516 nm, kompatibel mit dem FITC-Kanal der meisten Durchflusszytometer. Stellen Sie bei der Verwendung in Mehrfarbenpanels eine korrekte Kompensation sicher.
• Für optimale Färbung titrieren Sie den Antikörper, um die Arbeitskonzentration für Ihr spezifisches experimentelles System zu bestimmen. Fügen Sie geeignete Isotypkontrollen und Fluoreszenz-Minus-Eins (FMO)-Kontrollen hinzu, um Gating-Schwellenwerte festzulegen.
• Da die Expressionslevel von CD33 je nach Zelltyp und Aktivierungszustand variieren können, validieren Sie den Antikörper in Ihrer Probenmatrix (z. B. periphere mononukleäre Blutzellen, Knochenmark oder Zelllinien).

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