Kaninchen anti-Mensch CD326/EPCAM Monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FC - P16422

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Epithelialen Zelladhäsionsmoleküls (EpCAM)

• EpCAM ist ein transmembranes Glykoprotein des Typs I, das als homophiles Zelladhäsionsmolekül fungiert. Es vermittelt physikalische Wechselwirkungen zwischen intestinalen Epithelzellen (IECs) und intraepithelialen Lymphozyten (IELs), um die mukosale immunologische Barriere aufrechtzuerhalten.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Proliferation und Differenzierung von embryonalen Stammzellen, wobei die Expressionslevel nach der Differenzierung schnell abnehmen.
• EpCAM reguliert die Expression von FABP5, MYC sowie den Zyklinen A und E hoch, wodurch es mit der Zellzyklusregulation und Wachstumskontrolle verbunden ist.
• Das Protein ist an der lateralen Zellmembran und an den Tight Junctions lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Zell-Zell-Adhäsion und der epithelialen Integrität übereinstimmt.
• Gewebespezifität: Hoch und selektiv exprimiert in undifferenzierten embryonalen Stammzellen und fast allen epithelialen Zellmembranen, aber fehlend in mesodermalen oder neuralen Zellmembranen; häufig auf der Oberfläche von Adenokarzinomen nachweisbar.
• Es ist ein gut charakterisiertes Tumorantigen und wird mit der hereditären nicht-polypösen Kolorektalkrebs in Verbindung gebracht.
• Das prozessierte Protein enthält ein Signalpeptid, eine Transmembranhelix, Disulfidbindungen und N-Glykosylierungsstellen, mit einer berechneten molekularen Masse von etwa 34,9 kDa.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 24-265), wodurch zu erwarten ist, dass Antikörper entstehen, die zugängliche Epitope auf der Zelloberfläche targetieren – geeignet für Lebendzellfärbung oder nicht-permeabilisierte Bedingungen.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle basierend auf der Targetlokalisation an lateralen Membranen und Tight Junctions optimieren; validieren Sie in menschlichen epithelialen Zelllinien.
• Bei der Durchflusszytometrie (FC) verwenden Sie das direkt konjugierte Format; titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen, und fügen Sie geeignete Isotypkontrollen hinzu.
• Aufgrund der ausschließlichen Kreuzreaktivität mit Mensch überprüfen Sie die Zielproteinexpression in Ihrem Zell- oder Gewebsmodell vor der Verwendung.
• Das Proteingewicht beträgt etwa 35 kDa; bestätigen Sie dies mit Molekulargewichtsmarkern und Blockierungsbedingungen in nachfolgenden Assays.

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