Kaninchen-anti-humaner CD317/BST2-monoklonaler Antikörper für FC – Q10589

Technische Kerndaten und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD317/BST2

• Das Knochenmarkstromalantigen 2 (BST2), auch als HM1.24-Antigen oder Tetherin bekannt, ist ein durch Interferon induzierter antiviraler Wirtsrestriktionsfaktor. Verwandte Referenzen: PMID:18200009 PMID:18342597 PMID:19036818

• Wirkt als physisches Halteband für neu gebildete Virionen, indem es sie mit der Zellmembran oder miteinander verbindet und dadurch die Freisetzung verschiedener behüllter Viren blockiert, darunter Retroviren, Filoviren, Arenaviren, Herpesviren, Rhabdoviren, Orthomyxoviren, Paramyxoviren und Coronaviren. Verwandte Referenzen: PMID:18200009 PMID:18342597 PMID:19179289

• Kodiert zwei Isoformen: Isoform 1 aktiviert NF-kappa-B und wird durch HIV-1 Vpu abgebaut, während Isoform 2 gegen Vpu resistent ist und in dessen Gegenwart die virale Knospung einschränkt sowie die durch Isoform 1 vermittelte Signalübertragung hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:23028328 PMID:26172439

• Lokalisiert sich im Golgi-Apparat, im trans-Golgi-Netzwerk, in der Zellmembran, in Membran-Rafts, im Zytoplasma, in der apikalen Zellmembran und in späten Endosomen.

• Wird überwiegend in Leber, Lunge, Herz und Plazenta exprimiert; in Zellen des multiplen Myeloms überexprimiert; stark exprimiert auf B-Zellen, T-Zellen, Monozyten, NK-Zellen und dendritischen Zellen.

• GPI-verankertes Membranprotein mit einer Signalanker-Transmembranhelix, N-Glykosylierung und Disulfidbrücken.

• Reguliert die Matrixmetalloproteinase MMP14 negativ, wodurch die Aktivierung von MMP15 vermindert und das Zellwachstum sowie die Zellmigration gehemmt werden. Verwandte Referenzen: PMID:22065321

• Stimuliert die LILRA4/ILT7-Signalübertragung in plasmazytoiden dendritischen Zellen und sorgt während einer Virusinfektion für eine negative Rückkopplung der IFN-Produktion. Verwandte Referenzen: PMID:19564354 PMID:26172439

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 49–160) des humanen CD317/BST2, einschließlich der an der Dimerisierung und viralen Anheftung beteiligten Coiled-Coil-Region. Es sollte in Betracht gezogen werden, die Antikörperbindung an natives und rekombinantes Protein im relevanten Probensystem zu validieren.

• Dieser mit konjugierte Antikörper eignet sich für die Durchflusszytometrie. Die optimalen Färbekonzentrationen sollten mithilfe bekannter positiver Zelllinien, wie beispielsweise aus multiplem Myelom abgeleiteten Zellen oder mit IFN behandelten Primärzellen, titriert werden.

• Die Spezifität sollte durch den Vergleich der Färbung von Wildtypzellen mit BST2-Knockout- oder -Knockdown-Zellen überprüft werden. Außerdem sollte eine mögliche Vpu-vermittelte Herunterregulierung in HIV-1-infizierten Proben berücksichtigt werden.

• Zu den ergänzenden Anwendungen kann die Immunfluoreszenz an permeabilisierten Zellen zur Untersuchung der subzellulären Lokalisation gehören, wobei die Leistung experimentell bestätigt werden sollte.

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