Kaninchen anti-Mensch CD307b Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q96LA5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD307b (FCRL2)

• CD307b, auch bekannt als Fc-Rezeptor-ähnliches Protein 2 (FCRL2), FcRH2 oder IRTA4, ist ein Transmembranrezeptor der Immunglobulin-Superfamilie. Es enthält mehrere immunglobulinähnliche Domänen und gehört zur Familie der Fc-Rezeptor-ähnlichen Proteine.
• Das Protein könnte eine regulatorische Rolle bei der normalen und neoplastischen B-Zellentwicklung spielen, wie sein Expressionsmuster und seine strukturellen Merkmale vermuten lassen.
• FCRL2 wird beim Menschen durch das FCRL2-Gen kodiert und befindet sich auf Chromosom 1q23.2. Es erfährt alternatives Spleißen, wodurch mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Gewebeverteilungen entstehen.
• Subzellulär ist CD307b über eine einzelne Transmembranhelix an der Zellmembran verankert, mit einer extrazellulären Domäne, die potenzielle Glykosylierungsstellen und Disulfidbindungen enthält, die seine Immunglobulinfaltungen stabilisieren.
• Die Gewebeexpression ist auf reife B-Zelllinien beschränkt, insbesondere in sekundären lymphatischen Organen wie Milz und Lymphknoten. Es ist hoch exprimiert in CD19+ B-Zellen und in den Mantelzonen von Tonsillengewebe. Auf Proteinebene wird es bevorzugt in Gedächtnis-B-Zellen nachgewiesen.
• Isoform 2 wird in Milz, peripherem Blut und Knochenmark exprimiert, während die Isoformen 2 und 4 in B-Zelllinien vorkommen, was auf eine komplexe Expressionsregulation hinweist.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Glykosylierung als Glykoprotein, und das Protein enthält konservierte Disulfidbindungen, die für seine Domänenarchitektur wichtig sind. Diese Merkmale sind typisch für Zelloberflächenrezeptoren, die an der Immunsignalisierung beteiligt sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses Antikörpers verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 20–395 von humanem CD307b umfasst, was der gesamten extrazellulären Domäne (ECD) entspricht. Dieses Design führt wahrscheinlich zu Antikörpern, die die native Konformation des Zelloberflächenrezeptors erkennen.
• Da dieser Antikörper mit konjugiert ist, ist er direkt für die Durchflusszytometrie (FC) einsatzbereit, ohne dass eine sekundäre Färbung erforderlich ist. Erwägen Sie eine Titration des Antikörpers, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihre spezifischen B-Zellproben zu bestimmen.
• Aufgrund der eingeschränkten Expression von CD307b auf reifen und Gedächtnis-B-Zellen sollten Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. humane periphere mononukleäre Blutzellen oder Tonsillen-abgeleitete B-Zellen) und Isotypkontrollen verwenden, um die Spezifität sicherzustellen.
• Da der Antikörper nur für humane Reaktivität validiert ist, ist keine Kreuzreaktivität mit anderen Spezien zu erwarten. Bei der Verwendung in einem nicht-menschlichen System wird eine Vorprüfung empfohlen, falls eine Kreuzreaktivität vermutet wird.
• Stellen Sie für die FC-Färbung sicher, dass die Zellen vital sind und dass Fc-Rezeptoren blockiert werden, um unspezifische Bindung zu minimieren – insbesondere bei der Arbeit mit B-Zellpopulationen, die andere Fc-Rezeptoren exprimieren.

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