ABflo 488 Kaninchen anti-human CD301/CLEC10A monoklonaler Antikörper für FC - Q8IUN9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD301/CLEC10A-Funktion und -Lokalisierung

• CD301/CLEC10A fungiert als ein C-Typ-Lektin-Rezeptor, der spezifisch N-Acetylgalactosamin (GalNAc)-terminierte Glykane auf Glykoproteinen und Glykolipiden in einer Ca²⁺-abhängigen Weise erkennt, einschließlich Tn-Antigen, T-Antigen und LacdiNAc-Epitopen. Verwandte Referenzen:
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:17616966 | PMID:23507963

• Es wirkt als Signalrezeptor an der Schnittstelle von APC-T-Zell-Interaktionen, reguliert die CD45-Phosphataseaktivität auf Effektor-T-Zellen herunter und fördert die Toleranz dendritischer Zellen, was zur Erzeugung immunsuppressiver regulatorischer CD4⁺-T-Zellen führt. Verwandte Referenzen:
  PMID:15802303 | PMID:16998493 | PMID:22213806

• Als endozytischer Mustererkennungsrezeptor internalisiert CD301/CLEC10A Tn-Antigen-tragende Tumormuzine und transportiert sie zu endolysosomalen Kompartimenten für die MHC-Klasse-I- und -II-Antigenpräsentation, was zur Antitumor-Immunität beiträgt. Verwandte Referenzen:
  PMID:15802303 | PMID:17616966 | PMID:17804752

• CD301/CLEC10A ist an der Zellmembran, der frühen Endosomenmembran und der Lysosomenmembran lokalisiert, was mit seinen Rollen bei der Ligandenbindung, Internalisierung und Antigenverarbeitung übereinstimmt.

• Das Protein wird hauptsächlich in myeloischen antigenpräsentierenden Zellen exprimiert, einschließlich dermaler dendritischer Zellen in Lymphknoten und Haut.

• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen von CD301/CLEC10A, was zur funktionellen Vielfalt beiträgt; die kanonische Isoform hat eine vorhergesagte Molekülmasse von ~35 kDa, mit zusätzlichen Banden bei 28 kDa und 32 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 61–316) umfasst einen großen Teil der extrazellulären Domäne, einschließlich der Kohlenhydraterkennungsdomäne (CRD). Dieses Design erzeugt wahrscheinlich Antikörper, die natives CD301/CLEC10A in der Durchflusszytometrie erkennen.

• Die ABflo 488-Konjugation bietet einen direkten Fluoreszenzfarbstoff für die Ein-Schritt-Färbung; schließen Sie immer geeignete Isotypenkontrollen und Fluorescence-Minus-One (FMO)-Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.

• Für FC optimieren Sie die Antikörpertitrationen unter Verwendung einer relevanten Zelllinie oder primärer myeloischer dendritischer Zellen; ein typischer Startkonzentrationsbereich liegt bei 0,5–5 µg pro Million Zellen, dies sollte jedoch empirisch bestimmt werden.

• Da CD301/CLEC10A auf myeloischen DCs und Makrophagen exprimiert wird, ziehen Sie die Verwendung von PBMCs oder monozyten-abgeleiteten dendritischen Zellen zur Validierung in Betracht; überprüfen Sie die Expression durch Co-Färbung mit Linienmarkern (z.B. CD14, CD1c).

• Der Antikörper könnte auch zum Nachweis von tumorinfiltrierenden dendritischen Zellen in dissoziierten Tumorproben geeignet sein; validieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, falls eine intrazelluläre Färbung erforderlich ist.

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