Kaninchen anti-humaner CD300c monoklonaler Antikörper für IF/ICC, FC - Q08708

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD300c-Funktion und -Lokalisierung

• CD300c (CMRF35-ähnliches Molekül 6), kodiert durch das CD300C-Gen, ist ein Typ-I-Transmembranprotein, das zur CD300-Familie von Leukozyten-Oberflächenrezeptoren gehört.
• CD300c fungiert als Immunrezeptor, der an der Modulation von angeborenen und adaptiven Immunantworten durch Interaktionen mit seinen Liganden auf Zielzellen beteiligt ist.
• Es ist Teil des CD300-Genclusters auf Chromosom 17q25, das Rezeptoren mit Immunoglobulin-ähnlichen Domänen kodiert, die vielfältige Rollen in der Immunzellregulation spielen.
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Signaltransduktion nach Ligandenbindung übereinstimmt.
• CD300c wird auf der Oberfläche von Monozyten, Neutrophilen und Subsets von peripheren T- und B-Lymphozyten exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen ein Signalpeptid, Disulfidbindungen und N-verknüpfte Glykosylierung, die für Mitglieder der Immunglobulin-Superfamilie charakteristisch sind.
• Eine dreidimensionale Struktur von CD300c wurde aufgeklärt, die Einblicke in die Architektur seiner extrazellulären Domäne und potenzielle Ligandenbindungsflächen gibt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 21–183), wodurch der Antikörper für den Nachweis von Oberflächen-CD300c mittels Durchflusszytometrie ohne Permeabilisierung geeignet ist.
• Das -Konjugat ermöglicht den direkten Nachweis sowohl in der Immunfluoreszenz (IF/ICC) als auch in der Durchflusszytometrie (FC); achten Sie bei der Mehrfachfärbung mit anderen Fluorophoren auf eine ordnungsgemäße Kompensation.
• Für IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da der Antikörper auf ein Transmembranprotein abzielt; typische Protokolle mit 4% PFA-Fixierung gefolgt von Permeabilisierung mit Triton X-100 oder Saponin können geeignet sein.
• Schließen Sie in der Durchflusszytometrie geeignete Isotypenkontrollen und Fluoreszenz-minus-eins (FMO)-Kontrollen ein, um die Hintergrundfärbung und die Gating-Grenzen zu beurteilen.
• Da der Antikörper an humanen Proben validiert ist, führen Sie einen Titrationsexperiment durch, um die optimale Konzentration für Ihr spezifisches zelluläres System und Ihre Anwendung zu bestimmen.

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