Kaninchen anti-Mensch CD270/HVEM Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q92956

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD270/HVEM

• CD270/HVEM, auch bekannt als TNFRSF14, HVEA oder TR2, ist ein transmembraner Typ-I-Rezeptor der TNF-Rezeptor-Superfamilie. Es wird berichtet, dass durch alternatives Spleißen multiple Isoformen entstehen (UniProt Q92956).
• Es fungiert als Rezeptor für vier verschiedene Liganden: die Mitglieder der TNF-Superfamilie TNFSF14/LIGHT und homotrimeres LTA sowie die Mitglieder der Immunglobulin-Superfamilie BTLA und CD160, wodurch ein komplexes stimulatorisches und inhibitorisches Signalnetzwerk entsteht (PubMed:10754304, PubMed:18193050, PubMed:23761635). Zugehörige Referenzen: PMID:10754304, PMID:18193050, PMID:23761635
• Nach Bindung von TNFSF14/LIGHT übermittelt es kostimulatorische Signale an T-Zellen und fördert die Zellproliferation und Effektorfunktionen über TRAF2-TRAF3 E3-Ligase-abhängige Signalwege (PubMed:19915044, PubMed:9153189, PubMed:9162022). Zugehörige Referenzen: PMID:19915044, PMID:9153189, PMID:9162022
• Die Interaktion mit CD160 auf NK-Zellen erhöht die Produktion von Interferon-Gamma und unterstützt antitumorale Immunantworten (PubMed:23761635). In Epithelzellen löst die CD160-Bindung die Produktion von antimikrobiellen Proteinen und proinflammatorischen Zytokinen aus. Zugehörige Referenzen: PMID:23761635
• Die Bindung an CD160 auf aktivierten CD4+ T-Zellen downreguliert die kostimulatorische CD28-Signalgebung und schränkt dadurch Gedächtnis- und alloantigenspezifische Immunantworten ein (PubMed:18193050). Zugehörige Referenzen: PMID:18193050
• HVEM dient außerdem als Rezeptor für das Glykoprotein D der Herpes-simplex-Viren Typ 1 und 2 (HSV-1/HHV-1 und HSV-2/HHV-2) und vermittelt den viralen Eintritt in Wirtszellen.
• Subzelluläre Lokalisation: überwiegend an der Zellmembran. Es ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Lunge, Milz und Thymus und kommt auf B-Zellen, Monozyten und nai ven T-Zellen vor.
• Zu den wichtigsten strukturellen Merkmalen gehören ein Signalpeptid, extrazelluläre cysteinreiche Wiederholungen, eine Transmembranhelix und intrazelluläre Signalmotive. Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 39–162 von humanem CD270/HVEM umfasst und einen Teil der extrazellulären Domäne abdeckt. Diese Region ist wichtig für die Ligandenbindung und es ist wahrscheinlich, dass Antikörper generiert werden, die die native Konformation erkennen.
• Dieser Antikörper ist direkt mit konjugiert, einem rotfernen Fluoreszenzfarbstoff, der für die Durchflusszytometrie geeignet ist. Es empfiehlt sich, den Antikörper zu titrieren, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihre spezifischen Zellproben zu bestimmen.
• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie geeignete Kontrollen einschließlich Isotypkontrollen und Viabilitäts-Gating. Validieren Sie die Reaktivität des Antikörpers an relevanten humanen Zelllinien oder primären Immunzellen, von denen bekannt ist, dass sie CD270/HVEM exprimieren, wie z. B. T-Zellen, B-Zellen oder Monozyten.
• Da CD270/HVEM nach Ligandenbindung abgespalten wird oder internalisiert werden kann, achten Sie bei der Einrichtung Ihres Assays auf die Zellhandhabung und die Stimulationsbedingungen.

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