Kaninchen-anti-humaner CD262/DR5/TRAILR2-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - O14763

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD262/DR5/TRAILR2

• CD262/DR5/TRAILR2, kodiert durch das Gen TNFRSF10B, ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie. Es ist auch als Todesrezeptor 5 (DR5) und TRAIL-Rezeptor 2 (TRAIL-R2) bekannt und dient als Rezeptor für den zytotoxischen Liganden TNFSF10/TRAIL. Verwandte Referenzen: PMID:10549288
• Nach der Bindung von TRAIL rekrutiert der Rezeptor das Adaptermolekül FADD und Caspase-8 und bildet den Todesrezeptor-induzierenden Signalkomplex (DISC). Dies löst die proteolytische Aktivierung von Caspase-8 und eine Caspase-Kaskade aus, die zur Apoptose führt. DR5 fördert außerdem die Aktivierung von NF-kappa-B und ist für die durch ER-Stress induzierte Apoptose essenziell.
• Der Rezeptor wird in adulten und fetalen Geweben weit verbreitet exprimiert, mit sehr hohen Konzentrationen in Tumorzelllinien (z. B. HeLaS3, K-562, HL-60) und Organen wie Herz, Leber, Bauchspeicheldrüse, Milz, Thymus, Prostata, Eierstock und Gebärmutter. Im Gehirn ist er nicht nachweisbar.
• Auf subzellulärer Ebene ist CD262/DR5/TRAILR2 ein Transmembranprotein (membrangebunden), wobei durch alternatives Spleißen oder das Abspalten der Ektodomäne potenziell lösliche Isoformen entstehen können.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die zur korrekten Faltung und Ligandeninteraktion beitragen. Das Protein weist außerdem ein Signalpeptid, extrazelluläre cysteinreiche Wiederholungen, eine Transmembranhelix und eine zytoplasmatische Todesdomäne auf.
• UniProt-Schlüsselwörter weisen auf seine Funktionen bei der Apoptose und beim alternativen Spleißen sowie auf seine Klassifizierung als Rezeptor mit proteomischer Identifizierung und Bestimmung der 3D-Struktur hin.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 56–182 des humanen CD262/DR5/TRAILR2 und liegt in der extrazellulären Ligandenbindungsdomäne. Dieses Design begünstigt die Erkennung des nativen Rezeptors auf der Zelloberfläche.
• Dieser Antikörper wird als -Konjugat bereitgestellt und ermöglicht den direkten Nachweis in der Durchflusszytometrie, ohne dass ein Sekundärantikörper erforderlich ist. Es sollte eine Titration des Antikörpers durchgeführt werden, um die optimale Konzentration für den jeweiligen Zelltyp zu bestimmen.
• Für das Protein wurden mehrere Molekulargewichtsformen berichtet (12 kDa/45 kDa/47 kDa), die möglicherweise alternatives Spleißen, Glykosylierung oder Spaltprodukte widerspiegeln. Beachten Sie, dass die Bandenmuster im Western Blot variieren können; dieses Produkt wird jedoch für die Durchflusszytometrie empfohlen.
• Bei Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokollen für die Durchflusszytometrie sollte überprüft werden, ob das Epitop (extrazelluläre Domäne) nach der Behandlung zugänglich bleibt. Für Oberflächenrezeptoren wird in der Regel eine Färbung lebender Zellen empfohlen.
• Da DR5 in vielen Tumorzelllinien stark exprimiert wird, werden positive Kontrollen wie HeLaS3 oder K-562 empfohlen, während aus dem Gehirn stammende Zellen als Negativkontrollen dienen können.

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