Kaninchen anti-Human CD261/TRAIL-R1 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - O00220

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD261/TRAIL-R1

• TNFRSF10A, auch bekannt als Todesrezeptor 4 (DR4) oder TRAIL-R1, ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie. Es dient als Rezeptor für das zytotoxische Liganden TNFSF10/TRAIL. Verwandte Referenzen: PMID:26457518, PMID:38532423
• Bei TRAIL-Bindung rekrutiert der Rezeptor das Adaptermolekül FADD und Caspase-8, um den todinduzierenden Signalkomplex (DISC) zu bilden, der Caspase-8 proteolytisch aktiviert und die apoptotische Caspase-Kaskade einleitet. Verwandte Referenzen: PMID:19090789
• TRAIL-R1 fördert auch die Aktivierung von NF-kappa-B und verknüpft es damit mit entzündlichen und Überlebenssignalwegen. Verwandte Referenzen: PMID:9430227
• Das Protein lokalisiert sich primär zur Zellmembran und Membran-Rafts, wurde aber auch im Zytoplasma und Zytosol nachgewiesen.
• Es ist weit verbreitet exprimiert, mit hohen Spiegeln in Milz, peripheren Blutzellen, Dünndarm und Thymus sowie in bestimmten Krebszelllinien wie K-562 und MCF-7.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbrückenbildung, Glykosylierung, Methylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion und Stabilität regulieren können.
• Als Typ-I-Transmembranprotein enthält es ein Signalpeptid, extrazelluläre cysteinreiche Wiederholungen, eine Transmembranhelix und eine zytoplasmatische Todesdomäne.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 124–232), was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop an der Zelloberfläche anzielt, was für die Durchflusszytometrie-Detektion von lebenden, nicht permeabilisierten Zellen optimal ist.
• Als fluoreszenzmarkiertes Konjugat wird eine sorgfältige Titration empfohlen, um das optimale Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen; typische Startkonzentrationen für die Durchflusszytometrie können im Bereich von 0,1–1 µg pro Test liegen, sollte aber experimentell validiert werden.
• Stellen Sie geeignete Kontrollen sicher, einschließlich Isotypkontrollen und ungefärbter Zellen, um Gates festzulegen und die Hintergrundfärbung spezifisch für Ihre Zelllinien und Behandlungsbedingungen zu bewerten.
• Für eine umfassende Analyse der TRAIL-induzierten Apoptose sollten Sie eine Co-Färbung mit Markern für Apoptose (z. B. Annexin V, gespaltene Caspase-3) oder anderen Todesrezeptoren (z. B. TRAIL-R2/DR5) in Betracht ziehen.

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