Kaninchen Anti-Human CD261/TRAIL-R1 Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - O00220

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von CD261/TRAIL-R1

• CD261, auch bekannt als TRAIL-R1, DR4 oder TNFRSF10A, ist ein Todesrezeptor, der zur Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie gehört und spezifisch an das zytotoxische Liganden TNFSF10/TRAIL bindet, um Apoptose zu induzieren (PubMed:26457518, PubMed:38532423). Verwandte Referenzen: PMID:26457518, PMID:38532423
• Nach TRAIL-Bindung oligomerisiert der Rezeptor und rekrutiert das Adapterprotein FADD, welches wiederum Prokaspase-8 rekrutiert, um den todinduzierenden Signalkomplex (DISC) zu bilden. Dies löst die autoproteolytische Aktivierung von Kaspase-8 aus und initiiert die Kaspase-Kaskade, die zur Apoptose führt (PubMed:19090789). Verwandte Referenzen: PMID:19090789
• Neben der Apoptose kann die TRAIL-R1-Signalisierung die Aktivierung des NF-kappa-B-Weges fördern und zur transkriptionellen Regulation von Immun-, Überlebens- und entzündungsassoziierten Genen beitragen (PubMed:9430227). Verwandte Referenzen: PMID:9430227
• Die Expression ist weit verbreitet, wobei die höchsten Spiegel in Milz, peripheren Blutzellen, Dünndarm, Thymus und bestimmten Tumorzelllinien, einschließlich K-562 und MCF-7, beobachtet werden; sie wird auch auf aktivierten T-Zellen exprimiert.
• Subzellulär ist TRAIL-R1 hauptsächlich auf der Zellmembran und innerhalb von Membran-Rafts zu finden, kann sich aber auch im Zytoplasma und Zytosol lokalisieren.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung, die für seine Funktion als transmembraner Signalrezeptor charakteristisch sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper ist an konjugiert, was ihn für die direkte Durchflusszytometrie geeignet macht, ohne dass Sekundärnachweisreagenzien erforderlich sind.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 124-232), was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich den nativen Oberflächenrezeptor erkennt; validieren Sie die Reaktivität in geeigneten Zelllinien, die CD261 exprimieren.
• Optimieren Sie die Färbekonzentrationen durch Titration unter Verwendung bekannter positiver und negativer Kontrollzellen (z. B. K-562 oder MCF-7 für positiv, rezeptornegative Zellen für negativ).
• Für die intrazelluläre Detektion sollten Sie geeignete Permeabilisierungsmethoden in Betracht ziehen, obwohl die Hauptanwendung die Oberflächenfärbung ist.
• Vermeiden Sie längere Lichteinwirkung, um die Stabilität des Fluorophors zu erhalten und Photobleaching zu minimieren.

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