Kaninchen-anti-humaner CD228/MFI2-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P08582

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD228/MFI2 (Melanotransferrin)

• Melanotransferrin (CD228/MFI2) ist ein Glykoprotein der Zellmembran, das an der zellulären Eisenaufnahme beteiligt ist; es bindet ein Eisenatom pro Untereinheit und kann möglicherweise auch Zink binden.
• Das Protein wird internalisiert und anschließend zur Zellmembran zurückgeführt, was auf eine Rolle beim Eisentransport und bei der Eisenhomöostase hindeutet.
• Es wird überwiegend in humanen Melanomen und bestimmten fetalen Geweben exprimiert und kommt außerdem in Leber, Epithel, Nabelschnur, Plazenta und Schweißdrüsengängen vor.
• Es wird durch das MELTF-Gen (MAP97, MFI2) kodiert; alternatives Spleißen kann Isoformen hervorbringen. Das Volllängenprotein hat ein Molekulargewicht von etwa 80 kDa (UniProt: 80.215 Da), mit einer möglichen prozessierten Form bei etwa 32 kDa.
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich an der Zellmembran, und das Protein ist über einen GPI-Anker befestigt, wodurch es als lipidverankertes Membranprotein klassifiziert wird.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung, was mit seiner Funktion an der Zelloberfläche übereinstimmt.
• Es gehört zur Transferrin-Familie und wurde in der Melanom-Biologie untersucht, wodurch es zu einem potenziellen Ziel für die Krebsforschung wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Verwenden Sie für die Durchflusszytometrie ein geeignetes Protokoll zur Färbung der Zelloberfläche mit lebenden Zellen; vermeiden Sie die Permeabilisierung, um die Membranlokalisation von CD228 zu erhalten.
• Validieren Sie die Antikörperbindung in Melanom-Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie CD228 exprimieren (z. B. SK-MEL-28), um die Spezifität sicherzustellen.
• Schließen Sie Isotypkontrollen und Schritte zur Blockierung von Fc-Rezeptoren ein, um eine unspezifische Bindung zu minimieren.
• Optimieren Sie die Detektoreinstellungen für den -Fluorophor (Anregung/Emission ähnlich wie bei PE-Texas Red) an Ihrem Durchflusszytometer.

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