Kaninchen anti-human CD22 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P20273

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD22-Funktion und Lokalisierung

• CD22, auch bekannt als Siglec-2 oder B-Lymphozyten-Zelladhäsionsmolekül (BL-CAM), ist ein transmembranes Glykoprotein aus der Familie der sialinsäurebindenden Immunglobulin-ähnlichen Lektine (Siglec). Es wird stark auf B-Zellen exprimiert und fungiert als inhibitorischer Korezeptor, der die B-Zell-Rezeptor (BCR)-Signalübertragung moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:34330755, PMID:8627166
• Nach BCR-Aktivierung werden die immunorezeptortyrosinbasierten inhibitorischen Motive (ITIMs) von CD22 durch die Src-Kinase LYN phosphoryliert, was die Proteintyrosinphosphatase PTPN6 (SHP-1) rekrutiert. Dies führt zu einer Abschwächung der Calcium-Mobilisierung und zellulären Aktivierung, reguliert B-Zell-Antworten negativ und kann unter starken Signalen Apoptose induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:8627166, PMID:20516366
• CD22 bindet spezifisch an α2,6-verknüpfte Sialinsäurereste auf Glykoproteinen wie CD45, IgM und CD22 selbst in einer cis-Konfiguration und kann auch als Adhäsionsmolekül durch trans-Wechselwirkungen mit Liganden auf anderen Zellen dienen. Verwandte Referenzen: PMID:20172905
• Das Protein spielt eine wesentliche Rolle bei der B-Zell-Differenzierung, Antigenpräsentation und dem Trafficking ins Knochenmark, wobei seine Expression hauptsächlich auf reife B-Lymphozyten beschränkt ist. Verwandte Referenzen: PMID:34330755, PMID:8627166
• CD22 unterliegt alternativem Spleißen, wodurch Varianten mit unterschiedlicher Anzahl extrazellulärer Ig-ähnlicher Domänen entstehen; es ist auch stark glykosyliert und phosphoryliert, Merkmale, die zu seiner Funktion und Regulation beitragen.
• Das vollständige humane CD22 besteht aus 847 Aminosäuren mit einer berechneten Molekülmasse von etwa 95,3 kDa und enthält ein N‑terminales Signalpeptid, sieben Ig‑ähnliche C2‑Typ-Domänen, eine Transmembranhelix und einen cytoplasmatischen Schwanz mit ITIM- und ITIM-ähnlichen Motiven.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen (rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 20–687 umfasst) deckt die gesamte extrazelluläre Region von humanem CD22 ab, einschließlich aller Ig-ähnlichen Domänen, was zur Erkennung des nativen Proteins auf lebenden Zellen beiträgt.
• Als vorkonjugierter Antikörper () ist dieses Reagenz direkt für die Durchflusszytometrie ohne sekundären Färbeschritt einsatzbereit; dennoch sollte der Antikörper auf relevanten positiven und negativen Zelllinien titriert werden, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.
• Gängige humane B‑Zelllinien (z. B. Raji, Daudi, Ramos) exprimieren hohe CD22-Level und können als positive Kontrollen dienen; ein Isotyp-Kontrollantikörper wird empfohlen, um die Hintergrundbindung zu beurteilen.
• Für mehrfarbige Durchflusszytometrie-Panels sollten Fluoreszenzkompensationskontrollen eingeschlossen werden, und es ist zu bedenken, dass die CD22-Expression durch den Aktivierungsstatus der B‑Zelle moduliert werden kann.

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