ABflo 647 Kaninchen-anti-humaner CD172a/SIRPα-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – P78324

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD172a/SIRPα

• SIRPα (Signal-regulierendes Protein Alpha), auch bekannt als SHPS-1, CD172a und MYD-1, ist ein Transmembran-Glykoprotein, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört (UniProt P78324).
• Es fungiert als immunglobulinähnlicher Zelloberflächenrezeptor für CD47 und vermittelt Zell-Zell-Interaktionen sowie Signalübertragung (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Nach der Bindung an CD47 fungiert SIRPα als Docking-Protein, das die Tyrosinphosphatasen PTPN6 und PTPN11 an die Plasmamembran rekrutiert und transloziert und dadurch die Phagozytose, die Aktivierung von Mastzellen und die Aktivierung dendritischer Zellen negativ reguliert (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• SIRPα ist an der negativen Regulation zellulärer Reaktionen beteiligt, die durch Rezeptor-Tyrosinkinasen vermittelt und durch Zelladhäsion, Wachstumsfaktoren oder Insulin induziert werden (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Es spielt eine Rolle bei der antiviralen Immunität, indem es eine Infektion mit Arenaviren der Neuen Welt durch eine verringerte Virusinternalisierung begrenzt (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Es fungiert als Rezeptor für Thrombospondin-1 (THBS1) und vermittelt die Phosphorylierung sowie die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) über die NADPH-Oxidase (PubMed:24511121). Zugehörige Referenzen: PMID:24511121
• Es unterstützt die Adhäsion von Kleinhirnneuronen, das Auswachsen von Neuriten und die Anheftung von Gliazellen; möglicherweise spielt es eine Schlüsselrolle bei der Synaptogenese und der synaptischen Funktion (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Es wird ubiquitär exprimiert, mit hohen Konzentrationen im Gehirn; es wird auf myeloiden Zellen sowie in geringeren Konzentrationen in Herz, Plazenta, Lunge, Hoden, Eierstock, Kolon, Leber, Dünndarm, Prostata, Milz, Niere, Skelettmuskel und Pankreas nachgewiesen.
• Es ist subzellulär in der Membran lokalisiert und verfügt über extrazelluläre immunglobulinähnliche Domänen, eine einzelne Transmembranhelix und einen zytoplasmatischen Schwanz mit ITIM-Motiven; es unterliegt alternativem Spleißen und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Region (Aminosäuren 31–370) des humanen SIRPα, wodurch sich dieses ABflo-647-Konjugat ideal zum Nachweis von auf der Oberfläche exprimiertem Protein in lebenden, nicht fixierten Zellen eignet.
• Für die Durchflusszytometrie sollten humane mononukleäre Zellen des peripheren Blutes, aus Monozyten gewonnene dendritische Zellen oder SIRPα-positive Zelllinien verwendet werden; schließen Sie eine CD47-Fc-Blockierungskontrolle ein, um die spezifische Bindung zu überprüfen.
• Da es sich um einen direkt konjugierten Antikörper handelt, ist kein sekundärer Färbeschritt erforderlich – optimieren Sie die Titration im relevanten Probensystem, um das Signal-Rausch-Verhältnis auszugleichen.
• Stellen Sie sicher, dass eine geeignete Isotypkontrolle und ein Viabilitätsfarbstoff verwendet werden, um auf lebende Einzelzellpopulationen zu gaten; vermeiden Sie eine übermäßige Interpretation der Expression in gemischten Kulturen.

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