Kaninchen anti-humaner CD16b monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - O75015

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Niedrigaffiner Immunglobulin-Gamma-Fc-Region-Rezeptor III-B (CD16b) Funktion und Lokalisation

• CD16b (FCGR3B) ist ein niedrigaffiner Rezeptor für die Fc-Region von Immunglobulin Gamma (IgG) und bindet sowohl komplexierte/aggregierte als auch monomere IgG. Im Gegensatz zu seinem Paralog CD16a (FCGR3A) vermittelt es keine antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität (ADCC) oder Phagozytose.
• Es kann als Falle für zirkulierende Immunkomplexe wirken, verhindert die Aktivierung von Neutrophilen und hilft gleichzeitig, IgG-Antigen-Aggregate aus der peripheren Zirkulation zu entfernen.
• Das Protein wird spezifisch auf polymorphkernigen Leukozyten (Neutrophilen) und auch auf stimulierten Eosinophilen exprimiert, was es vom breiteren Expressionsmuster von CD16a unterscheidet.
• CD16b ist ein alternatives Spleißprodukt des FCGR3B-Gens; es ist membranverankert über einen Glykosylphosphatidylinositol (GPI)-Anteil und fehlt eine Transmembrandomäne.
• Neben seiner volllängen Membranform kann eine sekretierte Form durch proteolytische Ablösung entstehen, was seine immunregulatorischen Rollen weiter erweitert.
• Wichtige strukturelle Merkmale umfassen zwei immunglobulinähnliche Domänen, konservierte Disulfidbindungen und mehrere N-Glykosylierungsstellen, die für die Ligandenbindung und Stabilität entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die extrazelluläre Domäne (Aminosäuren 20–208) ab und zielt auf die Ligandenbindungsregion ab; es wird erwartet, dass es sowohl membrangebundene als auch lösliche Formen von CD16b erkennt.
• Dieser Antikörper ist direkt mit , einem photostabilen Farbrot-Fluorophor, konjugiert und eignet sich für die Durchflusszytometrie ohne einen sekundären Färbeschritt.
• Für eine optimale Zelloberflächenfärbung verwenden Sie gewaschenes Vollblut oder gereinigte Neutrophile; Fixierung/Permeabilisierung ist nicht erforderlich, es sei denn, ein intrazellulärer oder totaler Proteinnachweis ist gewünscht.
• Da die CD16b-Expression auf Neutrophile und stimulierte Eosinophile beschränkt ist, fügen Sie immer geeignete Isotyp-Kontrollen und einen Pan-Leukozyten-Marker (z. B. CD45) hinzu, um die Zellspezifität zu bestätigen.
• Bei der Analyse der Immunkomplexbindung sollten Sie eine Vorblockierung mit Humanserum oder gereinigtem IgG in Betracht ziehen, um unspezifische Wechselwirkungen über andere Fc-Rezeptoren als CD16b zu minimieren.

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