Kaninchen-anti-humaner CD146-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P43121

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD146/MUC18

• CD146 (auch bekannt als MUC18, MCAM, MelCAM) ist ein zur Immunglobulin-Superfamilie gehörendes Zelloberflächen-Glykoprotein, das vom MCAM-Gen (Gen-ID: 4162) kodiert wird.
• Es fungiert als Ca²⁺-unabhängiges Zelladhäsionsmolekül, trägt zum Zusammenhalt der Endothelzell-Monoschicht an interzellulären Verbindungen bei und erleichtert möglicherweise während der Metastasierung die Interaktion von Melanomzellen mit dem Gefäßsystem.
• CD146 löst intrazelluläre Signale aus, indem es als Oberflächenrezeptor wirkt und die Tyrosinphosphorylierung von FYN und PTK2/FAK1 sowie einen vorübergehenden Anstieg der intrazellulären Kalziumkonzentration induziert.
• Das Protein ist in der Plasmamembran (Membran) lokalisiert und wird auf Endothelzellen im gesamten Gefäßsystem, in der glatten Gefäßmuskulatur sowie vorübergehend auf Neuralleistenzellen während der embryonalen Migration exprimiert.
• Bei Krebs steht die CD146-Expression in engem Zusammenhang mit der Tumorprogression und Metastasierung, insbesondere beim malignen Melanom, bei dem CD146 in metastatischen Läsionen und fortgeschrittenen Primärtumoren stark exprimiert wird, in benignen Nävi jedoch selten vorkommt.
• Das reife Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, darunter N-Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Phosphorylierung. Alternatives Spleißen führt zur Bildung mehrerer Isoformen.
• Schlüsselwörter: Zelladhäsion, Immunglobulindomäne, Glykoprotein, Phosphoprotein, Transmembranhelix.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein hergestellt, das die extrazelluläre Domäne (AS 24–559) des humanen CD146 umfasst, wodurch die Reaktivität mit den nativen extrazellulären Epitopen gewährleistet wird.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Verdünnung für den jeweiligen Zelltyp und Versuchsaufbau zu bestimmen. Geeignete Isotypkontrollen und einen Viabilitätsfarbstoff einbeziehen.
• Die Färbung in relevanten humanen Zelllinien, die CD146 exprimieren, wie Melanomzellen (z. B. A375) oder Endothelzellen (z. B. HUVEC), validieren und nicht markierte oder Isotypkontroll-Antikörper verwenden, um die unspezifische Bindung zu beurteilen.
• Da das Doppelbandmuster (57 kDa/72 kDa) möglicherweise Glykosylierungsvarianten widerspiegelt, sollte das erwartete Molekulargewicht in den Proben bei Bedarf durch ergänzende Methoden bestätigt werden.

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