Kaninchen anti-humaner CD141/Thrombomodulin monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P07204

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Thrombomodulin-Funktion und -Lokalisierung

• Thrombomodulin (CD141/BDCA-3, auch bekannt als Fetomodulin) ist ein Transmembranrezeptor, der reichlich auf vaskulären Endothelzellen exprimiert wird und bei der Hämostase, Gerinnung, Fibrinolyse, Entzündung und Angiogenese eine Rolle spielt. Verwandte Referenzen: PMID:10761923
• Es fungiert als Cofaktor für die Thrombin-vermittelte Aktivierung von Protein C auf der Endotheloberfläche und initiiert so den Antikoagulationsweg. Verwandte Referenzen: PMID:29323190, PMID:33836597, PMID:9395524
• Thrombomodulin beschleunigt die Aktivierung des Plasmacarboxypeptidase B2 (CPB2), das C-terminale basische Aminosäuren von Kinninen und Anaphylatoxinen abspaltet und so zur Hemmung der Fibrinolyse beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:26663133
• Es unterdrückt Entzündungen, indem es das proinflammatorische Molekül HMGB1 abfängt und so dessen Interaktion mit RAGE und anderen Rezeptoren verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:15841214
• Das Protein verändert die Spaltungsspezifität des Protease-aktivierten Rezeptors 1 (PAR1) und hemmt so die Endothelpermeabilität und Entzündung (By similarity).
• Subzelluläre Lokalisierung: überwiegend membranständig.
• Gewebespezifität: Die Expression ist auf Endothelzellen beschränkt.
• Strukturelle Merkmale umfassen eine EGF-ähnliche Domäne, Disulfidbindungen, Glykosylierung und eine Proteoglykan-Modifikation; das reife Protein wandert bei etwa 60 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieses -Konjugat ist für die direkte Immunfluoreszenzfärbung und den durchflusszytometrischen Nachweis von humanem CD141/Thrombomodulin auf der Oberfläche lebender oder fixierter Zellen vorgesehen.
• Die optimale Antikörperkonzentration sollte durch Titration im relevanten experimentellen System bestimmt werden; ein Startbereich von 0,5–5 µg/mL wird häufig für die Zelloberflächenfärbung verwendet.
• Verwenden Sie geeignete Isotypenkontrollen und Vitalitätsfarbstoffe, um lebende Zellen zu unterscheiden und den Hintergrund zu minimieren.
• Vermeiden Sie bei der Probenvorbereitung eine Überverdauung mit Trypsin, da Thrombomodulin trypsinsensitiv ist; erwägen Sie die Verwendung nicht-enzymatischer Dissoziationsreagenzien.
• CD141 wird stark auf vaskulären Endothelzellen exprimiert; erwägen Sie die Verwendung von primären Endothelzellkulturen oder peripheren Blut-Endothelprogenitorzellen als positive Kontrolle.
• Beachten Sie, dass der Antikörper eine extrazelluläre Epitop erkennt; für die Oberflächenfärbung ist keine Permeabilisierung erforderlich, kann aber bei Bedarf nach Fixierung für intrazelluläre Pools eingesetzt werden.

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