Kaninchen anti-Human CD101/IGSF2 monoklonaler Antikörper für IF/ICC und FC - Q93033

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD101/IGSF2

• CD101 (IGSF2, V7, EWI-101) ist ein Transmembran-Glykoprotein aus der Immunglobulin-Superfamilie, das durch extrazelluläre Immunglobulin-ähnliche Domänen und einen zytoplasmatischen Schwanz charakterisiert ist.
• Es fungiert als negativer Regulator der T-Zell-Aktivierung: Es hemmt die CD3-induzierte Proliferation, reguliert die IL2RA (CD25)-Expression herunter und reduziert die IL-2-Sekretion.
• Mechanistisch unterdrückt CD101 Tyrosinkinasen, die PLCG1-Phosphorylierung und den Kalziumfluss, wodurch die für die T-Zell-Aktivierung essenzielle NFAT-Kern-Translokation blockiert wird.
• Das Protein wird auf der Plasmamembran von aktivierten T-Zellen, Monozyten, Granulozyten und kutanen dendritischen Zellen exprimiert; Gewebepräsenz findet sich in Lunge, Thymus und Dünndarm.
• CD101 wird auch in einigen leukämischen Zellen nachgewiesen, insbesondere in CD4+ CD56+ blastischen Tumorzellen sowie bei Langerhans-Zell-Histiozytose-Patienten in Langerhans-Zellen.
• UniProt-Schlüsselwörter unterstreichen seine strukturellen Merkmale: Signalpeptid, Disulfidbrücken, Immunglobulin-Domänen, Transmembran-Helix und Glykosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (AS 21-410) deckt fast die gesamte extrazelluläre Region ab, daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich die native Konformation; er ist sehr gut geeignet für den Nachweis von CD101 auf der Zelloberfläche mittels IF/ICC und Durchflusszytometrie.
• Für IF/ICC versuchen Sie eine Paraformaldehyd-Fixierung mit und ohne Permeabilisierung, um die membranlokalisierte Färbung zu optimieren; der reine Oberflächennachweis kann Hintergrundsignale durch intrazelluläre Transitformen vermeiden.
• Verwenden Sie in der Durchflusszytometrie geeignete Isotyp-Kontrollen und validieren Sie an humanen Probentypen, von denen bekannt ist, dass sie CD101 exprimieren, wie z. B. aktivierte T-Zellen oder dendritische Zellen.
• Obwohl nicht als validierte Anwendung gelistet, könnte der Antikörper theoretisch im Western Blot funktionieren (vorhergesagtes Molekulargewicht ~115 kDa); jede Verwendung für WB sollte vom Benutzer unabhängig verifiziert werden.
• Der Antikörper ist mit konjugiert, einem stabilen roten Fluoreszenzfarbstoff; für indirekte Protokolle verwenden Sie einen Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper, der mit der Anregung/Emission des Farbstoffs kompatibel ist.

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