Kaninchen-anti-humaner BCL6-monoklonaler Antikörper für die intrazelluläre Durchflusszytometrie – P41182

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von BCL6

• BCL6 ist ein transkriptioneller Repressor, der für die Bildung von Keimzentren (GC) und die Affinitätsreifung von Antikörpern essenziell ist und Gene reguliert, die an Differenzierung, Entzündung, Apoptose und der Kontrolle des Zellzyklus beteiligt sind.
• Es bindet direkt an die DNA-Sequenz 5'-TTCCTAGAA-3' (BCL6-Bindungsstelle) oder reprimiert indirekt die Transkriptionsaktivität anderer Transkriptionsfaktoren.
• BCL6 ermöglicht es GC-B-Zellen, sich schnell zu vermehren und DNA-Brüche während des Immunglobulinklassenwechsels und der somatischen Hypermutation zu tolerieren, ohne eine p53-abhängige apoptotische Reaktion auszulösen.
• In follikulären T-Helferzellen CD4+ (T(FH)-Zellen) fördert BCL6 die Expression von T(FH)-bezogenen Genen und hemmt gleichzeitig die Differenzierung von T(H)1-, T(H)2- und T(H)17-Zellen.
• Es trägt außerdem zur Etablierung und Aufrechterhaltung des immunologischen Gedächtnisses sowohl für T- als auch für B-Zellen bei und unterdrückt die Makrophagenproliferation, indem es mit STAT5 um die DNA-Bindung konkurriert.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation modulieren die Aktivität von BCL6.
• Die subzelluläre Lokalisation ist nukleär; dort interagiert BCL6 mit Korepressoren und Histondeacetylasen, um Zielgene zu reprimieren.
• Gewebespezifität: vorwiegend exprimiert in B-Zellen und T-Zellen des Keimzentrums sowie in primären unreifen dendritischen Zellen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein erzeugt, das die Aminosäuren 235–350 des humanen BCL6 umfasst. Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sollten die Zellfixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, um die Zugänglichkeit des nukleären Antigens sicherzustellen.
• Es sollte erwogen werden, den Antikörper in relevanten humanen B-Zelllinien des Keimzentrums, T(FH)-Zellmodellen oder primären Immunzellen zu validieren und die Spezifität, sofern möglich, mithilfe von BCL6-Knockdown- oder Knockout-Kontrollen zu bestätigen.
• Aufgrund seiner nukleären Lokalisation können Permeabilisierungs­puffer mit starken Detergenzien für eine optimale Färbung erforderlich sein.

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