Kaninchen anti-human BCL6 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie (intrazellulär) - P41182

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BCL6-Funktion und -Lokalisierung

• BCL6 (B-Zell-Lymphom 6) ist ein transkriptioneller Repressor und Proto-Onkogen, auch bekannt als BCL5, LAZ3, ZBTB27 und ZNF51, das ein Zinkfinger- und BTB/POZ-Domäne enthaltendes Protein kodiert.
• Es ist ein Hauptregulator der Keimzentrums-(GC-)Reaktionen, unterdrückt Gene, die an Differenzierung, Entzündung, Apoptose und Zellzyklus beteiligt sind, um eine schnelle B-Zell-Proliferation und somatische Hypermutation zu ermöglichen.
• BCL6 bindet direkt an das spezifische DNA-Motiv 5'-TTCCTAGAA-3' und unterdrückt auch Transkriptionsfaktoren, wodurch AICDA indirekt hochreguliert wird, indem es microRNAs wie miR-155 unterdrückt.
• In follikulären Helfer-T-Zellen (TFH) fördert BCL6 die TFH-spezifische Genexpression, während es die Differenzierung in TH1-, TH2- und TH17-Linien hemmt, und ist für das immunologische Gedächtnis sowohl in T- als auch in B-Zellen essentiell.
• Jenseits von Lymphozyten unterdrückt BCL6 die Makrophagenproliferation, indem es mit STAT5 um Bindungsmotive auf Zielgenen wie CCL2 und CCND2 konkurriert.
• BCL6 lokalisiert überwiegend im Zellkern, was mit seiner Funktion als DNA-bindender transkriptioneller Regulator übereinstimmt.
• Es wird in Keimzentrums-T- und -B-Zellen sowie primären unreifen dendritischen Zellen exprimiert, wobei eine fehlerhafte Expression durch chromosomale Umlagerungen mit B-Zell-Lymphomen in Verbindung gebracht wird.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, Repressoraktivität und Interaktion mit Korepressoren modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen (Reste 235–350 von humanem/murinem BCL6) entspricht einer zentralen Region, die funktionell wichtige Domänen enthält; die Epitopzugänglichkeit bei der intrazellulären Färbung kann von einer effektiven nuklearen Permeabilisierung abhängen.
• Für die Durchflusszytometrie sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle verwendet werden, die für Kernproteine validiert sind, und eine geeignete Isotypenkontrolle sowie bekannte positive (z.B. Ramos-, Daudi-B-Zelllinien) und negative Zellpopulationen einbezogen werden.
• Die Antikörperkonzentration sollte durch Titration optimiert werden; die angegebene Anwendung ist die intrazelluläre Durchflusszytometrie – andere Anwendungen wurden nicht getestet und erfordern eine individuelle Validierung.
• Die BCL6-Expression kann transient und kontextabhängig sein; erwägen Sie Stimulations- oder Differenzierungsbedingungen, um die Expressionsniveaus in experimentellen Systemen zu modulieren.

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