Kaninchen anti-human BCL6 mAb - P41182

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BCL6-Funktion und -Lokalisierung

• BCL6 (B‑Zell-Lymphom 6) ist ein transkriptioneller Repressor und ein Mitglied der BTB‑POZ/Zinkfinger-Familie, der für die Keimzentrums (GC)-Bildung und die Antikörper-Affinitätsreifung essentiell ist.
• BCL6 bindet direkt an die DNA-Konsensussequenz 5’‑TTCCTAGAA‑3’ und bildet Komplexe mit Korepressoren und Histondeacetylasen, um Zielgene zu unterdrücken, die an Differenzierung, Apoptose und Zellzykluskontrolle beteiligt sind.
• In GC-B-Zellen ermöglicht BCL6 eine schnelle Proliferation und toleriert DNA-Brüche während des Klassenwechsel-Rekombination und der somatischen Hypermutation, während es gleichzeitig die p53‑abhängige Apoptose unterdrückt.
• In follikulären Helfer-T-Zellen (TFH) fördert BCL6 die TFH-assoziierte Genexpression und hemmt die Differenzierung in TH1-, TH2- oder TH17-Linien.
• BCL6 wird auch für die Etablierung und Aufrechterhaltung des immunologischen Gedächtnisses sowohl in T- als auch in B-Zellen benötigt und unterdrückt die Makrophagenproliferation, indem es mit STAT5 um die DNA-Bindung konkurriert.
• Das Protein ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert (UniProt: SUBCELLULAR LOCATION) und durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität regulieren.
• Humanes BCL6 wird als zwei Hauptisoformen von etwa 72 kDa und 78 kDa exprimiert, die durch alternatives Spleißen entstehen; es wird hauptsächlich in GC-T- und -B-Zellen sowie in unreifen dendritischen Zellen nachgewiesen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 235–350 von humanem BCL6, einer Region innerhalb der N-terminalen BTB-Domäne. Diese Domäne vermittelt Protein-Protein-Interaktionen, und es wird erwartet, dass der Antikörper natives BCL6 in der intrazellulären Durchflusszytometrie nach Fixierung und Permeabilisierung erkennt.
• Für die intrazelluläre Färbung (FC intra) verwenden Sie geeignete Fixierungs-/Permeabilisierungspuffer (z. B. auf Paraformaldehyd/Saponin-Basis) und titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihr experimentelles System zu bestimmen.
• Bestätigen Sie die BCL6-Expressionsmuster in Ihren Proben unter Verwendung bekannter Positivkontrollen wie humaner Tonsillen- oder Lymphknoten-Keimzentrumszellen und schließen Sie Isotypkontrollen ein, um unspezifische Bindung auszuschließen.
• Da BCL6 als Repressor fungiert, kombinieren Sie diesen Antikörper für die Multiparameter-Durchflusszytometrie mit Markern der B-Zell-Differenzierung (z. B. CD20, CD38) oder T-follikulären Helferzellen (z. B. CXCR5, PD‑1).

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