Kaninchen anti-humaner AXL monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P30530

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AXL-Funktion und -Lokalisierung

• AXL, kodiert durch das AXL (UFO)-Gen, ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die zur TAM-Familie (Tyro3, AXL, Mer) gehört und auch als ARK, UFO, JTK11 und Tyro7 bekannt ist.
• AXL überträgt extrazelluläre Signale durch Bindung seines Liganden GAS6 und reguliert so Zellüberleben, Proliferation, Migration und Differenzierung. Die Ligandenbindung induziert Dimerisierung und Autophosphorylierung, wodurch über PI3-Kinase und GRB2 der nachgeschaltete AKT-Signalweg aktiviert wird.
• AXL lokalisiert als Single-Pass Typ I-Membranprotein an der Zellmembran.
• AXL hemmt die durch Toll-like-Rezeptoren (TLR) vermittelte angeborene Immunsignalgebung und moduliert so die Immunantwort.
• AXL dient als Wirtszellrezeptor für mehrere Viren, darunter Lassa-Virus, lymphozytäres Choriomeningitis-Virus, Ebolavirus und Zika-Virus. Für das Zika-Virus fördert AXL den Eintritt in Gliazellen, Sertoli-Zellen und Astrozyten und verstärkt die Kinaseaktivität, um die Typ-I-Interferon-Signalgebung über einen SOCS1-abhängigen Mechanismus zu antagonisieren. Verwandte Referenzen: PMID:28076778 PMID:29379210 PMID:31311882
• AXL ist in metastatischen Kolontumoren hoch exprimiert, mit geringerer Expression in Primärtumoren und schwacher Expression in normalem Kolongewebe, was auf eine Rolle im Krebsfortschritt hindeutet.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen von AXL umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, was mit seinen Signal- und Umsatzfunktionen übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 33-449) umfasst die extrazelluläre Domäne von humanem AXL, was darauf hindeutet, dass der Antikörper wahrscheinlich den nativen Zelloberflächenrezeptor erkennt, was ihn für die Durchflusszytometrie geeignet macht.
• Für die Durchflusszytometrie sollte der Antikörper titriert werden, um die optimale Färbekonzentration zu bestimmen. Es sollten Vitalitätsfarbstoffe verwendet werden, um tote Zellen auszuschließen, und geeignete Isotypenkontrollantikörper für eine genaue Gating-Strategie einbezogen werden.
• Die Antikörperspezifität sollte an positiven Kontrollen wie AXL-transfizierten Zellen oder bekannten AXL-exprimierenden Zelllinien zusammen mit negativen Kontrollen validiert werden.
• Da es sich um einen direkt konjugierten Antikörper (ABflo 488) handelt, ist eine sekundäre Detektion nicht erforderlich. Während der Färbung und Aufnahme sollte vor Licht geschützt werden, um die Signalintegrität zu erhalten.

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