Kaninchen Anti-CD8a Monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P01732

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD8a

• CD8a (T-Zell-Oberflächenglykoprotein CD8 alpha-Kette) ist ein Transmembranprotein, auch bekannt als T-Lymphozyten-Differenzierungsantigen T8/Leu-2. Es wird vom CD8A-Gen kodiert (Gen-ID: 925) und spielt eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität.
• In T-Zellen fungiert CD8a als Korezeptor für MHC-Klasse-I-Moleküle. Es bindet gleichzeitig den T-Zell-Rezeptor (TCR) und MHC-Klasse-I auf antigenpräsentierenden Zellen, was zur Rekrutierung der Tyrosinkinase LCK führt. Dies initiiert intrazelluläre Signalkaskaden, die die Aktivierung von cytotoxischen T-Lymphozyten (CTL), die Zytokinproduktion und die Eliminierung von Zielzellen fördern.
• CD8 kann als disulfidverknüpftes Heterodimer mit CD8b (Alpha/Beta) oder als CD8a-Homodimer vorliegen. Die homodimere Form kommt auf Untergruppen von natürlichen Killerzellen (NK-Zellen), Gedächtnis-T-Zellen, intraepithelialen Lymphozyten, Monozyten und dendritischen Zellen vor.
• In NK-Zellen erleichtern CD8a-Homodimere die Konjugation mit und Lyse von Zielzellen und fördern das Überleben und die Differenzierung von aktivierten Lymphozyten zu Gedächtnis-CD8-T-Zellen.
• Subzellulär lokalisiert CD8a an der Zellmembran und wird zudem sezerniert. Es enthält ein Signalpeptid, eine Transmembrandomäne und immunglobulinähnliche Domänen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Palmitoylierung und die Bildung intramolekularer Disulfidbindungen, die für seine Stabilität und Funktion essenziell sind.
• Gewebeexpression: auf thymusabgeleiteten T-Zellen meist als Alpha/Beta-Heterodimer; auf plasmazytoiden dendritischen Zellen nach Stimulation durch das Herpes-simplex-Virus-1; und auf verschiedenen Immunzelluntergruppen als Homodimere.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper ist direkt mit konjugiert, sodass kein sekundärer Antikörper in durchflusszytometrischen Arbeitsabläufen benötigt wird. Fügen Sie geeignete Isotypkontrollen und eine Lebend-/Tot-Unterscheidung zu Ihrem Panel hinzu.
• Bereiten Sie Einzelzellsuspensionen aus frischen oder korrekt kryokonservierten Proben von Menschen oder Krabbenaffen zu. Eine Fc-Rezeptor-Blockade wird empfohlen, um unspezifische Bindung zu reduzieren.
• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 22–182), was die Erkennung der nativen membrangebundenen Form gewährleistet. Validieren Sie die Spezifität anhand bekannter positiver (z. B. humane PBMCs) und negativer Zellpopulationen.
• Die angegebenen unterschiedlichen Proteingewichte (21, 25, 30 kDa) spiegeln wahrscheinlich unterschiedliche Glykosylierung oder Isoformen wider. Bestätigen Sie das erwartete Bandenmuster in Ihrer Zielzellart bei der Verwendung komplementärer Techniken wie dem Western Blot.
• Obwohl primär für die Durchflusszytometrie entwickelt, ist eine Eignung für weitere Anwendungen (z. B. ICC, IHC) möglich; ein Pilotversuch unter Ihren spezifischen Bedingungen wird empfohlen.

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