RAB10-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P61026

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von RAB10

• Das Ras-verwandte Protein Rab-10 (RAB10) ist eine kleine GTPase, die zur Rab-Familie molekularer Schalter gehört, welche den intrazellulären Membrantransport regulieren. Es wechselt zwischen einer inaktiven GDP-gebundenen und einer aktiven GTP-gebundenen Form und rekrutiert Effektorproteine, um Vesikelbildung, -bewegung, -verankerung und -fusion zu steuern. Verwandte Referenzen: PMID:21248164

• RAB10 ist vorwiegend am biosynthetischen Transport vom Golgi-Apparat zur Plasmamembran beteiligt. Es reguliert die Bereitstellung von mit dem Glukosetransporter SLC2A4/GLUT4 angereicherten Vesikeln und von TLR4 an der Zelloberfläche und unterstützt den asymmetrischen Proteintransport, wodurch es die Glukosehomöostase und die angeborene Immunität beeinflusst.

• In polarisierten Zellen vermittelt RAB10 den basolateralen Transport vom trans-Golgi-Netzwerk. In Neuronen trägt es zur Axonogenese bei, indem es den vesikulären Membrantransport zur axonalen Plasmamembran lenkt. Verwandte Referenzen: PMID:16641372

• RAB10 ist an der Dynamik des endoplasmatischen Retikulums (ER) beteiligt und steuert die Tubulusbildung entlang der Mikrotubuli sowie die Tubulusfusion. Darüber hinaus spielt es eine Rolle bei der Phagosomenreifung und dem basolateralen Recyclingweg. Verwandte Referenzen: PMID:23263280

• Zusammen mit LRRK2, RAB8A und RILPL1 reguliert RAB10 die Ziliogenese. Die Phosphorylierung an Thr-73 durch LRRK2 fördert die Bindung an RILPL1 und hemmt dadurch die Zilienbildung. Verwandte Referenzen: PMID:30398148

• RAB10 wird nach der Phosphorylierung durch LRRK2 zu gestressten Lysosomen transportiert und fördert über die Effektoren EHBP1 und EHNP1L1 die extrazelluläre Freisetzung lysosomaler Inhalte. Außerdem erleichtert es den Export einer Untergruppe neu synthetisierter Proteine über einen Rab8-Rab10-Rab11-abhängigen endosomalen Transportweg. Verwandte Referenzen: PMID:30209220, PMID:32344433

• Das Protein ist in mehreren Membrankompartimenten lokalisiert, darunter zytoplasmatische Vesikel, der Golgi-Apparat, das trans-Golgi-Netzwerk, Endosomen (Recycling-Endosomen und Phagosomen), das ER, Lysosomen und das Basalkörperchen des Ziliums. Es wird im Hippocampus, in Neutrophilen und im Hoden exprimiert.

• RAB10 wird zur Verankerung an Membranen prenyliert und ist bekanntermaßen phosphoryliert, acetyliert und ubiquitiniert. Es ist an Neurodegeneration und mikrobieller Pathogenese beteiligt, da es die Replikation von Legionella pneumophila fördert, indem es Vakuolen in ER-ähnliche Kompartimente umgestaltet.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 101–200 des humanen RAB10 entspricht. Diese zentrale Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert, was mit der berichteten Kreuzreaktivität übereinstimmt. Bei der Verwendung dieses Antikörpers für den Western Blot wird eine spezifische Bande bei etwa 23 kDa erwartet. Zur Validierung der Leistung sollten geeignete positive und negative Zelllysate verwendet werden.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC zeigt RAB10 eine punktförmige Verteilung, die mit seiner Verbindung zu zytoplasmatischen Vesikeln, dem Golgi-Apparat und Endosomen übereinstimmt. Die Bedingungen für Permeabilisierung und Fixierung müssen möglicherweise optimiert werden, um dieses Muster zu erhalten. Eine Ko-Färbung mit Organellenmarkern kann dazu beitragen, die Spezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper ist auch für ELISA geeignet. Wie bei jedem Immunoassay sollte der Antikörper titriert werden, um optimale Arbeitskonzentrationen für das jeweilige Probensystem zu bestimmen.
• Beachten Sie, dass RAB10 phosphoryliert werden kann, beispielsweise durch LRRK2, was den Nachweis beeinträchtigen kann, wenn das Epitop maskiert ist. Überprüfen Sie die Reaktivität unter den relevanten experimentellen Bedingungen.

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