PUMA Kaninchen pAb für WB - Q96PG8/Q9BXH1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PUMA-Funktion und -Lokalisierung

• PUMA (p53-up-regulierter Modulator der Apoptose), auch bekannt als Bcl-2-bindende Komponente 3 (BBC3) oder JFY-1, wird beim Menschen durch das BBC3-Gen kodiert (Gen-ID: 27113).
• Das Protein unterliegt einem alternativen Spleißen, wodurch mehrere Isoformen mit unterschiedlichen Molekulargewichten entstehen; die kanonische Isoform (UniProt: Q96PG8) hat eine berechnete Masse von ca. 26,5 kDa.
• PUMA wird innerhalb der Bcl-2-Proteinfamilie klassifiziert, die durch ihre Fähigkeit zur Bindung an Bcl-2 charakterisiert ist.
• Die funktionelle Annotation deutet darauf hin, dass PUMA das Zellwachstum unter bestimmten experimentellen Bedingungen nicht beeinflusst (UniProt).
• Dieses Protein ist im Referenzproteom-Set von UniProt enthalten und wurde durch Proteomics-Ansätze identifiziert (Schlüsselwort: Proteomics-Identifizierung).
• Zusätzliche Schlüsselwörter umfassen alternatives Spleißen, was die Vielfalt der transkribierten Varianten widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 50–131 von humanem PUMA (NP_001120713.1) abdeckt, eine Region, die wahrscheinlich über die erkannten Isoformen hinweg konserviert ist, was zu einer Detektion mehrerer Bänder (10, 14, 20 und 26 kDa) im Western Blot führen kann.
• Für den Western Blot sollten Sie die Verwendung von Ganzzell-Lysaten aus humanen, murinen oder rattigen Zelllinien, die PUMA exprimieren, in Betracht ziehen; optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers und die Blockierungsbedingungen empirisch.
• Für IHC-P sollten formalinfixierte, in Paraffin eingebettete Gewebe evaluiert werden; Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. Citrat- oder EDTA-Puffer) können erforderlich sein.
• Für IF/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für den betreffenden Zelltyp validiert werden; je nach zellulärem Kontext kann eine nukleäre oder zytoplasmatische Lokalisierung beobachtet werden.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; die Paarung mit einem validierten Detektionsantikörper oder ein Peptid-Wettbewerb kann die Spezifität verbessern.

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