PTPRA Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P18433

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PTPRA

• PTPRA (Rezeptor-Tyrosinproteinphosphatase Alpha) ist ein Mitglied der klassischen Protein-Tyrosinphosphatase-Familie und verfügt über zwei intrazelluläre Phosphatase-Domänen sowie eine einzelne Transmembranregion.
• Es wirkt hauptsächlich bei der Integrin-vermittelten Dynamik fokaler Adhäsionen, indem es die Adapterproteine BCAR3, BCAR1 und CRK nach Bindung von Integrinen an Adhäsionsstellen rekrutiert.
• Diese Rekrutierung erleichtert die SRC-vermittelte Phosphorylierung von BCAR1 und die nachgeschaltete Aktivierung der PAK-Kinase sowie der kleinen GTPasen RAC1 und CDC42, wodurch die Umorganisation des Zytoskeletts reguliert wird.
• PTPRA lokalisiert überwiegend an der Zellmembran und ist an Zellverbindungen sowie fokalen Adhäsionen angereichert – was mit seiner Rolle bei adhäsionsvermittelter Signalgebung übereinstimmt.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen und ist glykosyliert; sein vorhergesagtes Molekulargewicht beträgt etwa 90,7 kDa, in Immunoblots wird es häufig bei 91 kDa beobachtet.
• Zu den wichtigsten posttranslationalen Modifikationen gehört die Phosphorylierung an mehreren Resten; das Protein wird unter Schlüsselwörtern wie 3D-Struktur, Glykoprotein, Hydrolase und Referenzproteom klassifiziert.
• Obwohl es hauptsächlich beim Menschen untersucht wurde, liegt die konservierte Expression bei Maus und Ratte der Kreuzreaktivität in diesen Spezies zugrunde.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 175-295 innerhalb der extrazellulären Domäne ab, was bedeutet, dass der Antikörper glykosylierte und Vorläuferformen erkennen kann; eine Deglykosylierung kann das Bandenmuster vereinfachen.
• Für Western Blot werden Standard-Reduktionsbedingungen und ein 7,5–10 %iges SDS-PAGE-Gel empfohlen; eine Anreicherung von Membranfraktionen oder Präparationen fokaler Adhäsionen erhöht die Signalintensität.
• Eine Bande nahe 91 kDa ist zu erwarten; überprüfen Sie das Molekulargewicht mit einem geeigneten Leiter und berücksichtigen Sie die Möglichkeit von alternativen Spleißvarianten mit leicht abweichenden Größen.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz gegen rekombinante PTPRA-Fragmente oder Zelllysate; validieren Sie die Spezifität anhand von Zellmodellen mit PTPRA-Überexpression im Vergleich zu PTPRA-Knockdown.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde bestätigt, aber validieren Sie immer in Ihrem spezifischen Zell- oder Gewebesystem, da potenzielle Epitopvariationen auftreten können.

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