PKM1-spezifischer Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P14618

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKM1 (Pyruvatkinase M1) Funktion und Lokalisierung

• PKM1 ist eine Isoform der Pyruvatkinase, die durch alternatives Spleißen des PKM-Gens entsteht und hauptsächlich in adulten Geweben exprimiert wird (PubMed:18337823). Verwandte Referenzen: PMID:18337823
• Es katalysiert den letzten geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Glykolyse, indem es eine Phosphorylgruppe von Phosphoenolpyruvat (PEP) auf ADP überträgt und ATP erzeugt (PubMed:15996096, PubMed:1854723, PubMed:20847263). Verwandte Referenzen: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• PKM1 existiert als konstitutiv aktives Tetramer und benötigt im Gegensatz zur embryonalen M2-Isoform keine allosterische Aktivierung durch Fructose-1,6-bisphosphat (FBP) (PubMed:20847263). Verwandte Referenzen: PMID:20847263
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär cytoplasmatisch, was mit seiner Rolle in der Glykolyse übereinstimmt.
• PKM1 wird in den meisten adulten differenzierten Geweben exprimiert, einschließlich Muskel und Gehirn, und ist in vielen Tumorzellen, in denen M2 vorherrscht, bemerkenswert abwesend oder herunterreguliert (PubMed:18337823). Verwandte Referenzen: PMID:18337823
• Das Protein unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Methylierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.
• PKM1 spielt eine kritische Rolle im Energiestoffwechsel, indem es das Schicksal von Glukosekohlenstoffen in Richtung ATP-Produktion anstelle von biosynthetischen Wegen bestimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid innerhalb der C-terminalen Region (aa 350–450) von humanem PKM1, was die Isoformenspezifität gewährleistet. Validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der PKM1- und PKM2-Expression in Kontrolllysaten.
• Für Western Blotting verwenden Sie adulte humane, murine oder Rattengewebe-Lysate (z.B. Skelettmuskel, Gehirn) als positive Kontrollen. Optimieren Sie die Antikörperverdünnung basierend auf dem Probentyp.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine cytoplasmatische Färbung zu erwarten. Schließen Sie geeignete Antigen-Retrieval- und Blockierschritte ein.
• Polyklonale Antikörper können von Charge zu Charge variieren; ziehen Sie für kritische Experimente eine chargenspezifische Validierung in Betracht.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht die Verwendung in gängigen Modellorganismen, bestätigen Sie jedoch die Sequenzhomologie der Immunogenregion, wenn zusätzliche Spezies getestet werden.

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