PKLR Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P30613

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PKLR-Funktion und Lokalisierung

• PKLR kodiert für die Pyruvatkinase-Isoenzyme L/R, auch bekannt als PK1, PKL und rote Zellen/Leber-Pyruvatkinase.
• Es katalysiert die Umwandlung von Phosphoenolpyruvat zu Pyruvat unter Synthese von ATP, ein Schlüsselschritt in der Glykolyse. Verwandte Referenzen: PMID:11960989
• PKLR produziert das Nebenprodukt 2-Phospholactat, das die Fructose-2,6-bisphosphat-Produktion hemmen kann; Dephosphorylierung durch PGP hebt diese Hemmung auf und ermöglicht das Fortschreiten der Glykolyse. Verwandte Referenzen: PMID:27294321
• Das Enzym wird allosterisch durch Fructose-1,6-bisphosphat und ATP reguliert und benötigt Metallionen wie Magnesium, Mangan und Kalium für seine Aktivität.
• Alternatives Spleißen erzeugt gewebespezifische Isoformen, die in Erythrozyten und Leber exprimiert werden.
• Mutationen in PKLR sind mit hereditärer hämolytischer Anämie verbunden, und das Protein unterliegt Phosphorylierung und anderen posttranslationalen Modifikationen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 446-556, einer Region, die sowohl in nativer als auch in denaturierter Form zugänglich sein kann, was die Verwendung in WB und ELISA unterstützt.
• Für Western Blot sollten 10–20 µg Zelllysat verwendet und mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen validiert werden, da die Detektion je nach Probe variieren kann.
• Aufgrund der polyklonalen Natur sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz für quantitative Assays überprüft werden; eine Ladekontrolle einbeziehen und die Detektionsbedingungen standardisieren.
• Beim Einrichten von ELISA den Antikörper titrieren und die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-PKLR unter Verwendung rekombinanter Proteine oder Zellextrakte bestätigen.

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