PKC-Alpha-Kaninchen-mAb für IF/ICC, ELISA – P17252

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Proteinkinase C alpha

• Die Proteinkinase C alpha (PKCα), kodiert durch das PRKCA-Gen (Aliase: PKCA, PRKACA), ist eine calciumaktivierte, phospholipid- und diacylglycerolabhängige Serin/Threonin-Proteinkinase. Sie gehört zur Familie der PKC-Kinasen, die eine zentrale Rolle in verschiedenen Signaltransduktionswegen spielen.
• PKCα ist an der positiven und negativen Regulation von Zellproliferation, Apoptose, Differenzierung, Migration, Adhäsion, Tumorentstehung, kardialer Hypertrophie, Angiogenese, Thrombozytenfunktion und Entzündung beteiligt. Sie phosphoryliert direkt Zielproteine wie RAF1, BCL2, CSPG4 und TNNT2/CTNT und aktiviert MAPK/ERK- sowie RAP1GAP-Signalkaskaden.
• In der Krebsbiologie wird PKCα in verschiedenen Tumoren, einschließlich Gliomen und Brustkrebs, stark exprimiert und kann dort als Tumorpromotor wirken. Durch die Unterdrückung der p53-vermittelten IGFBP3-Aktivierung und die Phosphorylierung von BCL2 übt sie antiapoptotische Funktionen aus. In Gliomzellen fördert sie das Zellwachstum über RAF1/MAPK/ERK.
• PKCα reguliert die Dynamik des Zytoskeletts und die Zellmigration. Beispielsweise phosphoryliert sie CSPG4, wodurch die Bildung von Lamellipodien und die Zellpolarisation induziert werden. Während der durch Chemokine induzierten Migration von CD4+-T-Zellen phosphoryliert PKCα DOCK8, was zur Aktivierung von CDC42 und zu einer gesteigerten Zellbeweglichkeit führt. Verwandte Referenzen: PMID:28028151
• Die subzelluläre Lokalisation von PKCα ist dynamisch: Abhängig von der Stimulation pendelt sie zwischen Zytoplasma, Zellmembran, mitochondrialer Membran und Zellkern. Dieser Transport ist für ihre Signalfunktionen bei Prozessen wie der Makrophagendifferenzierung und der Wundheilung entscheidend.
• Im kardiovaskulären System reguliert PKCα die Kontraktilität des Herzmuskels negativ, indem sie kardiales Troponin T (TNNT2/CTNT) phosphoryliert, wodurch die Aktomyosin-ATPase-Aktivität und die Calciumsensitivität reduziert werden. Außerdem fördert sie über die MAPK/ERK-Signalübertragung die kardiale Hypertrophie und ist für die Angiogenese essenziell, indem sie die Migration von Endothelzellen und die VEGFA-abhängige Signalübertragung vermittelt.
• PKCα unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die ihre Aktivität und Wechselwirkungen modulieren. Sie ist außerdem ein Protoonkogen und ein Eintrag im Referenzproteom (UniProt-Schlüsselwörter: Acetylierung, Apoptose, ATP-Bindung, Calcium, Zelladhäsion, Zellmembran, Zytoplasma, direkte Proteinsequenzierung, Kinase, Membran, Metallbindung, Mitochondrium, Nukleotidbindung, Zellkern, Phosphoprotein, Proteomik-Identifizierung, Protoonkogen, Referenzproteom, Wiederholung, Serin/Threonin-Proteinkinase, Transferase, Zink, Zinkfinger).
• PKCα phosphoryliert KLHL3 als Reaktion auf Angiotensin II und beeinflusst dadurch die WNK4-Signalübertragung und die Ionenhomöostase. Außerdem aktiviert sie LRRK1, das anschließend RAB-Proteine phosphoryliert, um den intrazellulären Transport zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:25313067 PMID:36040231

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Als Immunogen wurde rekombinantes humanes PKC-Alpha-Protein verwendet. Dieses Design führt typischerweise zu Antikörpern, die native Proteinkonformationen erkennen. Bei IF/ICC sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um die subzelluläre Lokalisation des Zielproteins (Zytoplasma, Membran, Zellkern) zu erhalten.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von PKCα in Zelllysaten oder gereinigten Proteinproben verwendet werden. Kombinieren Sie ihn mit einem geeigneten Detektionssystem und validieren Sie ihn im relevanten Probensystem, um die Spezifität sicherzustellen.
• Die Aktivierung von PKCα beinhaltet häufig eine Translokation. Daher kann bei IF/ICC-Experimenten die Stimulation mit Agonisten wie PMA dynamische Muster der Umverteilung sichtbar machen. Geeignete Kontrollen sollten stets eingeschlossen werden.
• Die Kreuzreaktivität wurde für den Menschen angegeben. Bei Bedarf sollte die Reaktivität mit anderen Spezies überprüft werden.

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