PIWIL4 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z3Z4

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PIWIL4-Funktion und -Lokalisierung

• PIWIL4 (auch als HIWI2 oder MIWI2 bezeichnet) ist ein Piwi-ähnliches Protein und Mitglied der Argonaute-Familie, das zentral für die piRNA-vermittelte Gen-Silencing ist.
• Essentiell für die Spermatogenese durch Unterdrückung transponibler Elemente und Aufrechterhaltung der Integrität der Keimbahn über den piRNA-Weg (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Funktioniert im Zellkern, um aktive Transposons zum Schweigen zu bringen, indem es mit neu synthetisierten Transkripten transponibler Elemente interagiert und die DNA-Methylierung und Repression lenkt (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Verfügt nicht über Endonuklease-Aktivität und wirkt als „Slicer-inkompetentes“ Element in der piRNA-Amplifikationsschleife (Ping-Pong), wobei gespaltene piRNAs von PIWIL2 geladen werden, um genomische Transposon-Loci zu zielen (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• Induziert „Lys-9“-Methylierung von Histon H3 an einigen Loci und trägt zur epigenetischen Silencing bei. Verwandte Referenzen: PMID:17544373
• Ubiquitär exprimiert in menschlichen Geweben, mit Nachweis in Retina, retinalem Pigmentepithel und verschiedenen Zelltypen. Verwandte Referenzen: PMID:17544373 PMID:22483988 PMID:25038252 PMID:28025795 PMID:28711973
• In somatischen Zellen lokalisiert im Zellkern und Zytoplasma; erhält die Integrität des retinalen Epithels über Akt/GSK3alpha/beta-Signalisierung, und Überexpression fördert onkogene Proliferation. Verwandte Referenzen: PMID:28025795 PMID:22483988

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 272-383 von menschlichem PIWIL4, einer Region, die basierend auf der berichteten Kreuzreaktivität wahrscheinlich bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist; erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers zum Nachweis von PIWIL4 in diesen Spezies.
• Für Western Blot (WB) wird ein Band um 97 kDa erwartet; die tatsächliche Wanderung kann jedoch aufgrund posttranslationaler Modifikationen oder Isoform-Varianten variieren. Fügen Sie geeignete positive Kontrolllysate hinzu.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist sowohl eine kern- als auch zytoplasmatische Färbung zu erwarten, die der subzellulären Verteilung von PIWIL4 entspricht; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen.
• Für ELISA verwenden Sie rekombinantes PIWIL4-Protein (oder das Immunogen) als Standard, um Assay-Parameter festzulegen; beachten Sie, dass der Antikörper denaturierte und native Proteinformen erkennen kann, da er gegen ein rekombinantes Fusionsprotein hergestellt wurde.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität im relevanten Probensystem (z. B. unter Verwendung von Knockdown- oder Knockout-Kontrollen), um die Zielerkennung zu bestätigen.

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