PIP5K1A Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q99755

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PIP5K1A

• PIP5K1A kodiert die 68 kDa große Phosphatidylinositol-4-phosphat-5-kinase Alpha Typ I (PIP5KIalpha), eine Lipidkinase, die zentral für die Phosphoinositid-Signalgebung ist.
• Katalysiert die Umwandlung von Phosphatidylinositol-4-phosphat (PI4P) zu Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2), einem kritischen lipidischen Second Messenger. Diese Aktivität ist der vorherrschende Weg für die PIP2-Synthese.
  Verwandte Referenzen: PMID:21477596, PMID:22942276, PMID:8955136
• PIP2 dient als Vorläufer für die Second Messenger Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3), Diacylglycerol (DAG) und Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PIP3) und vermittelt dadurch vielfältige Signaltransduktionskaskaden.
  Verwandte Referenzen: PMID:19158393, PMID:20660631
• Über die PIP2-Produktion reguliert PIP5K1A die Dynamik des Aktin-Zytoskeletts, Zelladhäsion, Motilität, Membran-Ruffling und die Bildung von Fokalkontakten. Es wird für Phagozytose, Thrombozytenadhäsion, Keratinozyten-Differenzierung und die insulininduzierte Translokation von Glukosetransportern benötigt.
• Im Kern aktiviert PIP5K1A die Adenylyltransferase-Aktivität von TUT1 in nuklearen Speckeln und reguliert dadurch die Polyadenylierung einer ausgewählten Gruppe von mRNAs.
  Verwandte Referenzen: PMID:18288197
• Lokalisiert an Zellmembran, im Zytoplasma, Kern, in nuklearen Speckeln und an Zellausläufern wie Ruffles und Lamellipodien, was seine vielseitigen Funktionen widerspiegelt.
• Wird stark exprimiert in Herz, Plazenta, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse, mit geringeren Gehalten im Gehirn, Lunge und Leber.
• Es wird als Phosphoprotein und Isopeptidbindungen enthaltendes Protein mit Ubiquitin-ähnlichen Konjugationsstellen aufgeführt; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 231‑500 von menschlichem PIP5K1A, eine Region, die wahrscheinlich konservierte Epitope enthält; Kreuzreaktivität mit Maus ist aufgrund der Sequenzhomologie in diesem Segment zu erwarten und bestätigt. Nutzen Sie eine Sequenzausrichtung, um die Reaktivität mit anderen Spezies zu bestätigen.
• Bei der Western Blotting ist eine Bande nahe 63 kDa zu erwarten. Verwenden Sie Lysate von Geweben mit hoher PIP5K1A-Expression (z. B. Herz, Skelettmuskel) als Positivkontrolle und schließen Sie Molekulargewichtsmarker ein, um die Bandengröße zu überprüfen.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können je nach Zelltyp und Kontext membranöse, zytoplasmatische und nukleäre Färbemuster beobachtet werden. Optimieren Sie die Antigen-Retrieval und schließen Sie relevante Negativkontrollen (z. B. ohne Primärantikörper oder präimmunes Serum) ein, um die Spezifität zu bewerten.
• ELISA kann für die Antikörpertitration oder Antigendetektion verwendet werden. Validieren Sie den Assay mit rekombinantem PIP5K1A-Protein oder Zellysaten und ermitteln Sie die optimalen Beschichtungs- und Detektionsbedingungen.
• Als polyclonaler Antikörper kann er mehrere Isoformen oder Abbauprodukte erkennen; bestätigen Sie die Spezifität durch Knockdown- oder Überexpressionsexperimente in Ihrem Modellsystem.

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