PIAS3 Kaninchen-pAk für WB, IHC-P, ELISA - Q9Y6X2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PIAS3-Funktion und -Lokalisierung

• PIAS3 (Protein Inhibitor of Activated STAT3) ist eine E3 SUMO-Protein-Ligase und ein SUMO-Verankerungsfaktor, der die Wechselwirkung zwischen dem E2-Enzym UBE2I und Substraten stabilisiert, um die SUMO-Konjugation zu katalysieren. Verwandte Referenzen: PMID:21965678, PMID:9388184
• Es fungiert als transkriptioneller Koregulator in mehreren Signalwegen, insbesondere durch Hemmung der STAT3-DNA-Bindungsaktivität und Unterdrückung des STAT3-vermittelten Zellwachstums.
• PIAS3 verstärkt die Sumoylierung des metastasienassoziierten Proteins MTA1 und kann zur paralogenselektiven Sumoylierung dieses Proteins beitragen. Verwandte Referenzen: PMID:21965678
• Es sumoyliert CCAR2 (DBC1), was die Wechselwirkung zwischen CCAR2 und der Deacetylase SIRT1 erleichtert und somit die SUMO-Modifikation mit regulatorischen Netzwerken der Deacetylierung verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:25406032
• PIAS3 kann die Sumoylierung von ZFHX3 (ATBF1) verringern, indem es dessen Kolokalisierung mit SUMO1 im Zellkern verhindert und so die Funktion von ZFHX3 als transkriptioneller Repressor moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:24651376
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend im Zytoplasma, Zellkern und in den Kernspeckles, was seinen Rollen in der subnukleären Signalgebung und Transkriptionsregulation entspricht.
• PIAS3 ist weitgehend in menschlichen Geweben exprimiert und enthält eine Zinkfingerdomäne, die für seine Ligaseaktivität und Substraterkennung unerlässlich ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen zielt auf die C-terminale Region (A.a. 452–628) von humanem PIAS3 ab; der Antikörper möglicherweise mehrere Isoformen oder posttranslational modifizierte Formen erkennen. Überprüfen Sie bei Bedarf die Spezifität für Ihre Isoform von Interesse durch Sequenzalignment und Epitop-Mapping, wenn eine Kreuzreaktivität mit PIAS-Familienmitgliedern bedenklich ist.
• Für Western Blots beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 68 kDa; jedoch können sumoylierte, phosphorylierte oder andere posttranslational modifizierte Spezies zusätzliche Bänder bei höherer oder aberranter Wanderung erzeugen. Validieren Sie dies in Ihrem Probensystem unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) können Antigen-Retrieval-Methoden wie die hitzeinduzierte Epitop-Retrieval (HIER) für eine optimale Detektion erforderlich sein. Angesichts der vorhergesagten zytoplasmatischen und nukleären Lokalisierung sollten Sie die Färbemuster mit bekannten Expressionsdaten vergleichen.
• Für ELISA kann das rekombinante Immunogen oder das全长-PIAS3-Protein als Fangantigen verwendet werden. Optimieren Sie die Beschichtungskonzentrationen und Assay-Bedingungen und fügen Sie geeignete Kontrollantigene sowie Sekundärantikörper-Kontrollen hinzu, um die Spezifität sicherzustellen.

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