PHYHD1 Kaninchen pAb für WB, IF/ICC, ELISA - Q5SRE7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PHYHD1

• PHYHD1 ist ein Protein 1 mit Phytanoyl-CoA-Dioxygenase-Domäne, das als 2-Oxoglutarat (2OG)-abhängige Dioxygenase wirkt und 2OG eisenabhängig zu Succinat und CO₂ umwandelt. Verwandte Referenzen: PMID:21530488
• Es koppelt den 2OG-Umsatz nicht an die Hydroxylierung von Acyl-Coenzym A-Derivaten; gegenüber Fettsäure-CoA-Thioestern wird keine Aktivität nachgewiesen, was darauf hindeutet, dass es nicht direkt am Phytanoyl-CoA-Stoffwechsel beteiligt ist. Verwandte Referenzen: PMID:21530488
• Alternatives Spleißen erzeugt die Isoformen 2 und 3, die wahrscheinlich keine katalytische Enzymaktivität besitzen.
• PHYHD1 enthält eine konservierte Eisenbindungsstelle, die typisch für die Familie der 2OG-abhängigen Dioxygenasen ist, was es als Oxidoreduktase einordnet, die auf einzelne Donoren mit Einbindung von molekularem Sauerstoff wirkt.
• Die Phosphorylierung von PHYHD1 wurde durch Proteomik nachgewiesen, was auf eine regulatorische posttranslationale Modifikation hindeutet.
• Es wurde eine 3D-Struktur für PHYHD1 bestimmt, die Einblicke in sein aktives Zentrum und seinen katalytischen Mechanismus bietet.
• Es wird als Komponente des Referenzproteoms annotiert, was eine hochwertige funktionelle und strukturelle Annotation gewährleistet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Der Antikörper, der gegen rekombinantes vollständiges PHYHD1 (Aa 1–291) gewonnen wurde, erwartet eine Bande nahe 32 kDa im WB bei Verwendung von Lysaten aus menschlichen, Maus- oder Rattenzellen.
• Für IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Ihren spezifischen Zelltyp; beachten Sie, dass PHYHD1 in bestimmten noch nicht definierten subzellulären Kompartimenten lokalisiert sein kann.
• Da das Immunogen das gesamte Protein abdeckt, erkennt der Antikörper wahrscheinlich alle Isoformen; bestätigen Sie bei Bedarf die isoformspezifische Expression mit zusätzlichen sequenz- oder domainspezifischen Werkzeugen.
• Da die Aktivität von PHYHD1 von Eisen abhängt, erhalten Sie die metallbindenden Bedingungen, wenn nachfolgend funktionelle Assays geplant sind.
• Die ELISA-Leistung kann für den quantitativen Nachweis weiter validiert werden; erwägen Sie die Paarung mit einem Einfangantikörper für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA.

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