Phospho-ZAP70-Y493 Kaninchen mAb - P43403

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ZAP70

• ZAP70 (Tyrosin-Proteinkinase ZAP-70), auch bekannt als Syk-verwandte Tyrosinkinase, ist ein 70 kDa zytoplasmatisches Protein der Syk-Kinase-Familie.
• Es spielt eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität durch Regulation der T-Zell- und B-Zell-Rezeptor-Signalgebung, wobei es Motilität, Adhäsion, Zytokinexpression und Thymozytenentwicklung beeinflusst.
• Nach der TCR-Bindung wird ZAP70 zu den phosphorylierten ITAM-Motiven von CD3E und CD247/CD3Z an der Plasmamembran rekrutiert, was die Autoinhibition aufhebt und zur Aktivierung führt (PubMed:7509083). Verwandte Referenzen: PMID:7509083
• Aktiviertes ZAP70 phosphoryliert die Schlüsseladapterproteine LAT und LCP2 und baut so Signalkomplexe auf, die die Lymphokinproduktion, T-Zellproliferation und Differenzierung antreiben.
• ZAP70 moduliert zudem die Zytoskelettdynamik, Adhäsion und Mobilität von T-Zellen und beteiligt sich an der TCR-Herunterregulation, indem es die Internalisierung und den Abbau von CD247/CD3Z über CBL und die Adapterproteine SLA/SLA2 fördert.
• Die subzelluläre Lokalisation ist hauptsächlich im Zytoplasma und an der Zellmembran; die Expression ist beschränkt auf T-Zellen, natürliche Killerzellen, frühe Thymozyten und Pro/Pre-B-Zellen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (kritisch für die Aktivität), Acetylierung und Ubiquitinierung; das Protein verfügt über SH2-Domänen, eine ATP-bindende Kinasedomäne und mehrere Phosphorylierungsstellen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Der Antikörper zielt auf die Phosphorylierungsstelle an Tyr493, einem kritischen Rest für die ZAP70-Aktivierung; verwenden Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Für IF/ICC validieren Sie die Färbespezifität durch Verwendung eines nicht phosphorylierten Peptidblocks oder durch Behandlung von Zellen mit einer Phosphatase, um einen Signalverlust zu bestätigen.
• Dieser Antikörper ist für ELISA geeignet; bei der Anpassung an andere Immunoassays titrieren und testen Sie ihn in Ihrer spezifischen Probenmatrix, um Linearität und Sensitivität sicherzustellen.

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