Phospho-VASP-S239 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P50552

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Vasodilatator-stimuliertem Phosphoprotein (VASP)

• VASP ist ein Mitglied der Ena/VASP-Proteinfamilie, die Aktin-assoziierte Proteine sind und am Umbau des Zytoskeletts und der Zellpolarität beteiligt sind.
• Es fördert die Verlängerung von Aktinfilamenten, indem es die spitzen Enden der Filamente vor Kapp-Proteinen schützt und die Rate der Aktinpolymerisation erhöht.
• VASP erleichtert den Transfer von Profilin-gebundenen Aktinmonomeren zu wachsenden spitzen Enden der Filamente und stimuliert so die Aktinfilamentverlängerung.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Thrombozytenaktivierung und -aggregation und reguliert die für die Thrombozytenfunktion wesentliche Aktindynamik.
• Das Protein ist in verschiedenen subzellulären Strukturen lokalisiert, einschließlich Zytoplasma, Fokaladhäsionen, Tight Junctions und der Membran von Lamellipodien und Filopodien.
• VASP ist in Thrombozyten stark exprimiert, was seine spezialisierte Rolle in diesen Zellen widerspiegelt.
• Die Phosphorylierung an Serin 239, neben anderen Stellen, stellt eine wichtige regulatorische Modifikation dar, die die VASP-Aktivität und -Wechselwirkungen beeinflusst.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um S239; daher detektiert der Antikörper spezifisch an dieser Stelle phosphoryliertes VASP. Fügen Sie Lysespuffern Phosphataseinhibitoren hinzu, um den Phosphorylierungsstatus während der Probenvorbereitung zu erhalten.
• Für Western Blot werden Thrombozytenlysate aufgrund der hohen VASP-Expression empfohlen; erwarten Sie ein Band bei etwa 40 kDa.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie kann eine Doppelfärbung mit Aktin-Markern oder Fokaladhäsionsproteinen helfen, die VASP-Lokalisierung in Lamellipodien, Filopodien oder Fokaladhäsionen sichtbar zu machen.
• Erwägen Sie die Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen (z. B. Phosphatase-behandelte Proben), um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.

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