Phospho-Tyrosin-Hydroxylase-S40 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P07101

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Tyrosin-Hydroxylase (TH)

• Tyrosin-Hydroxylase (TH), codiert durch das TH-Gen, ist auch als Tyrosin-3-Monooxygenase bekannt. Sie ist das geschwindigkeitsbegrenzende Enzym in der Katecholamin-Biosynthese und produziert Dopamin, Noradrenalin und Adrenalin.
• TH katalysiert die Hydroxylierung von L-Tyrosin zu L-DOPA unter Verwendung von Tetrahydrobiopterin (BH4) und molekularem Sauerstoff als Cosubstraten, ein kritischer Schritt für die Neurotransmittersynthese. Verwandte Referenzen: PMID:15287903 PMID:1680128 PMID:17391063 PMID:24753243 PMID:34922205 PMID:8528210
• Neben Tyrosin kann TH mit geringerer Spezifität Phenylalanin und Tryptophan hydroxylieren, wobei seine primäre physiologische Rolle die Katecholaminproduktion ist.
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen, die keine katalytische Aktivität besitzen und als regulatorische Untereinheiten oder dominant-negative Modulatoren fungieren können.
• TH wird vorwiegend im Gehirn und in den Nebennieren exprimiert, was mit seiner Rolle bei der neuronalen und hormonellen Katecholaminsynthese übereinstimmt.
• Das Protein lokalisiert sich in mehrere subzelluläre Kompartimente, einschließlich Zytoplasma, perinukleäre Region, Zellkern, Axonendigungen und synaptische Vesikel, was auf einen dynamischen Transport hindeutet.
• TH ist ein Phosphoprotein, und die Phosphorylierung an Resten wie Serin 40 (S40) moduliert die enzymatische Aktivität und die Katecholaminproduktion.
• Als Mitglied der biopterinabhängigen Familie der aromatischen Aminosäure-Hydroxylasen benötigt TH Eisen als Kofaktor für die Katalyse und ist mit neurologischen Erkrankungen wie der Parkinson-Krankheit und Dystonie verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Ser40 des menschlichen TH entspricht. Bestätigen Sie die Phosphorylierungsspezifität mithilfe von Phosphatase-behandelten Proben oder Blockierung mit nicht-phosphoryliertem Peptid.
• Für Western Blot (WB) wird das Proteingewicht von TH aufgrund von Phosphorylierung, alternativem Spleißen oder posttranslationalen Modifikationen bei 45–59 kDa beobachtet. Validieren Sie die Bandengröße in Ihrem Probensystem.
• In ELISA-Anwendungen können Sie den Antikörper zum Nachweis von phosphoryliertem TH in Zell- oder Gewebelysaten verwenden. Titrieren Sie den Antikörper, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit Ratten-TH. Bei der Arbeit mit anderen Spezies überprüfen Sie die Kreuzreaktivität, da die Sequenzhomologie die Erkennung beeinträchtigen kann.
• Lagern und handhaben Sie das Produkt wie empfohlen (versandt auf Eisbeuteln), um die Stabilität und Aktivität des Antikörpers zu bewahren.

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