Phospho-Tau-T181 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF-P, IHC-P, ELISA - P10636

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des mikrotubulus-assoziierten Proteins Tau

• Das mikrotubulus-assoziierte Protein Tau (MAPT) ist ein neuronales Phosphoprotein, das die Mikrotubulusassemblierung und -stabilität fördert und eine kritische Rolle bei der Etablierung und Aufrechterhaltung der neuronalen Polarität spielt. Es fungiert als Verknüpfung zwischen axonalen Mikrotubuli und der Plasmamembran. Verwandte Referenzen: PMID:21985311 PMID:32961270
• Alternatives Spleißen des MAPT-Gens erzeugt mehrere Isoformen; kurze Isoformen verleihen dem Zytoskelett Plastizität, während längere Isoformen vorwiegend Mikrotubuli stabilisieren.
• Tau wird vorwiegend in Neuronen des zentralen Nervensystems exprimiert, während die PNS-Tau-Isoform spezifisch für das periphere Nervensystem ist.
• Subzellulär lokalisiert Tau im Zytoplasma, Zytosol, Zytoskelett und der Zellmembran mit einer Anreicherung in Axonen und Dendriten; es wird auch sezerniert.
• Tau unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung (z. B. an T181, S202, T231), Acetylierung, Methylierung, Glykierung und Ubiquitinierung, von denen viele mit Tauopathien in Verbindung gebracht werden.
• Pathologische Hyperphosphorylierung und Aggregation von Tau führen zu Neurofibrillenbündeln, einem Kennzeichen der Alzheimer-Krankheit und verwandter neurodegenerativer Störungen; Mutationen in MAPT verursachen frontotemporale Demenz (FTDP-17).
• Das dynamische Gleichgewicht zwischen mikrotubulusgebundenem und freiem Tau reguliert das Neuritenwachstum, den axonalen Transport und die synaptische Plastizität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Wegen der phosphorylierungsspezifischen Natur dieses Antikörpers bestätigen Sie die Spezifität, indem Sie Zelllysate mit Lambda-Proteinphosphatase behandeln, was das Signal im Western Blot aufheben sollte.
• Für immunhistochemische Anwendungen berücksichtigen Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen sorgfältig; Phospho-Epitope können empfindlich gegenüber Hitze und pH sein.
• Verwenden Sie sowohl Gesamt-Tau- als auch Ladungskontrollen, um Phosphorylierungsänderungen genau zu bewerten.
• Bei der Detektion von endogenem Tau beachten Sie, dass das Protein im SDS-PAGE eine scheinbare molekulare Masse von 45–68 kDa aufweist, wobei das berechnete Gewicht der längsten Isoform 78,9 kDa beträgt; mehrere Bänder können Spleißvarianten und posttranslationale Modifikationen darstellen.
• Für die Co-Immunopräzipitation verwenden Sie frische Proben mit Phosphatasehemmern, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten.

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