Phospho-Syk-Y323 Kaninchen pAb für WB, IF/ICC - P43405

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Tyrosin-Protein-Kinase SYK Funktion und Lokalisierung

• Tyrosin-Protein-Kinase SYK (Spleen-Tyrosinkinase, p72-Syk) ist eine nicht-Rezeptor-Tyrosinkinase, die die Signaltransduktion stromabwärts einer Vielzahl von Transmembranrezeptoren vermittelt, einschließlich klassischer Immunrezeptoren wie dem B-Zell-Rezeptor (BCR). Verwandte Referenzen: PMID:12456653, PMID:15388330, PMID:34634301
• Über seine beiden SH2-Domänen assembliert SYK sich an der Plasmamembran in Signalkomplexe mit aktivierten Rezeptoren, indem er an Tyrosin-phosphorylierte ITAM-Domänen bindet, ein Prozess, der oft durch SRC-Familien-Kinasen initiiert wird.
• In B-Zellen ist SYK essentiell für die Reifung beim Übergang von Pro-B zu Prä-B-Zellen und phosphoryliert Schlüsseladapter wie BLNK sowie PLCG1 und BTK, um die BCR-Signalisierung weiterzuleiten. Verwandte Referenzen: PMID:12456653
• SYK spielt eine entscheidende Rolle in der angeborenen Immunität, indem es Reaktionen auf Pilz-, Bakterien- und Viruspathogene vermittelt, zum Beispiel über CLEC7A, was zur ROS-Produktion und Inflammasom-Aktivierung führt.
• Über Immunrezeptoren hinaus wirkt SYK stromabwärts von Zelladhäsionsrezeptoren, leitet Integrin-vermittelte Aktivierung von Neutrophilen und Makrophagen weiter und ist an der Plättchenaktivierung durch Kollagen und Podoplanin beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:12387735
• SYK reguliert diverse biologische Prozesse einschließlich Osteoklastenreifung, Gefäßentwicklung und der intestinalen Immunantwort über NF-κB-vermittelte Zytokinproduktion. Verwandte Referenzen: PMID:12387735, PMID:33782605
• Subzellulär findet sich SYK an der Zellmembran und im Zytoplasma/Zytosol. Es wird weitgehend in hämatopoetischen Zellen exprimiert, insbesondere in Neutrophilen und während der gesamten B-Zell-Entwicklung.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (die Y323-Stelle ist kritisch für die Aktivierung), und es enthält SH2-Domänen und eine ATP-bindende Kinasedomäne.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein Phospho-spezifisches Peptid um Tyrosin 323 von humanem SYK hergestellt. Die Immunogen-Sequenz entspricht einer Phosphorylierungsstelle, von der bekannt ist, dass sie die SYK-Aktivierung und die nachgeschaltete Signalisierung reguliert.
• Für eine optimale Detektion von phosphoryliertem SYK sollten Phosphatase-Inhibitoren in allen Lyse- und Assay-Puffern enthalten sein, um den Phosphorylierungszustand des Zielproteins zu erhalten.
• Das Produkt wird für WB und IF/ICC empfohlen. Bei WB ist eine Bande nahe 72 kDa zu erwarten. Für IF/ICC sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte für die Membran- und Zytosol-Lokalisierung des Ziels optimiert werden.
• Erwägen Sie, den Antikörper in Ihrem relevanten Proben-System unter Bedingungen zu validieren, unter denen die SYK-Phosphorylierung induziert wird (z.B. BCR-Stimulation) im Vergleich zu nicht-induzierten Kontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.

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