Phospho-STING/TMEM173-S365 Kaninchen pAb - Q3TBT3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: STING (Stimulator der Interferon-Gene Protein) Funktion und Lokalisierung

• STING (Stimulator der Interferon-Gene), auch bekannt als TMEM173, ist ein angeborener Immunsensor, der zytosolische DNA von Bakterien und Viren erkennt und zur Produktion von Typ-I-Interferon führt. Verwandte Referenzen: PMID:18818105 PMID:19433799 PMID:19776740
• Es bindet direkt zyklische Dinukleotide wie c-di-GMP, cUAMP und cGAMP, mit einer starken Präferenz für das 2'-3'-Verbindungsisomer von cGAMP, das durch das Enzym cGAS produziert wird. Verwandte Referenzen: PMID:21947006 PMID:23258412 PMID:23519410 PMID:26300263
• Nach Ligandenbindung oligomerisiert STING und translokiert vom endoplasmatischen Retikulum zum ER-Golgi-Zwischenkompartiment, wo es durch TBK1 am pLxIS-Motiv (einschließlich S365 in der Maus) phosphoryliert wird, um IRF3 zu rekrutieren und zu aktivieren und so die Interferonexpression zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:25636800 PMID:27324217 PMID:29973723
• Über die Interferoninduktion hinaus fördert STING unabhängig von TBK1 die Autophagie, indem es COPII-Vesikel bildet, die zum ERGIC führen, das als Membranplattform für die LC3-Lipidierung und Autophagosomenbildung dient, die auf zytosolische DNA oder Krankheitserreger abzielt. Verwandte Referenzen: PMID:30568238
• STING lokalisiert an mehreren Membranen, einschließlich des endoplasmatischen Retikulums, des ER-Golgi-Zwischenkompartiments, des Golgi-Apparats, von Autophagosomen, der Mitochondrien-Außenmembran und Lysosomen, was sein dynamisches Trafficking und seine vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression ist in Milz, Thymus und dendritischen Zellen ausgeprägt, was mit seiner Schlüsselrolle in der Immunüberwachung übereinstimmt.
• Kritische posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an S365 und anderen Resten, Palmitoylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivierung, sein Trafficking und seine Stabilität regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser polyklonale Kaninchenantikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid hergestellt, das der S365-Phosphorylierungsstelle von Maus-STING entspricht; er erkennt vorzugsweise die phosphorylierte Form – überprüfen Sie die Spezifität mithilfe von Phosphatase-behandelten Proben oder einem Wettbewerb mit einem nicht-phosphorylierten Peptid.
• Für die Western-Blot-Analyse wird ein Band nahe 43 kDa erwartet; fügen Sie dem Lysepuffer Phosphataseinhibitoren hinzu, um die endogene Phosphorylierung während der Probenvorbereitung zu erhalten.
• Der Antikörper zeigt, wie angegeben, Kreuzreaktivität mit humanem und murinem STING; jedoch wird eine spezies-spezifische Validierung im relevanten Probensystem (z. B. stimulierte Immunzellen) vor quantitativen Anwendungen empfohlen.
• Obwohl er für ELISA geeignet ist, sollten optimale Beschichtungskonzentrationen, Blockierbedingungen und Nachweisverdünnungen empirisch für jedes Assay-Format bestimmt werden.

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