Phospho-STAT5A-Y694 Kaninchen-mAk für WB, IHC-P, ELISA - P42229

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: STAT5A-Funktion und Lokalisierung

• STAT5A ist ein Dual-Funktions-Protein, das bei der Signaltransduktion und Aktivierung der Transkription wirkt und zelluläre Reaktionen auf verschiedene Zytokine und Wachstumsfaktoren vermittelt.
• Es ist ein wichtiger nachgeschalteter Mediator für KITLG/SCF, ERBB4 und aktivierte FGF-Rezeptoren (FGFR1-4).
• STAT5A bindet an das GAS-Element und fördert die Prolaktin-induzierte Transkription, was für die Regulierung der Milchprotein-Genexpression während der Laktation essentiell ist.
• Nach Aktivierung translokiert STAT5A vom Zytoplasma in den Zellkern, um seine transkriptionellen Regulationsfunktionen auszuüben.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung (z.B. an Y694), Ubiquitinierung und alternativem Spleißen, die seine Aktivität modulieren.
• Es verfügt über eine SH2-Domäne zur Signalbindung und eine DNA-Bindungsdomäne zur Genregulation, was es als Transkriptionsfaktor-Aktivator klassifiziert.
• STAT5A wurde in Proteomik-Studien identifiziert und dient als Referenzproteom in umfassenden menschlichen Proteinkatalogen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y694 von humanem STAT5A (UniProt P42229); stellen Sie sicher, dass die Probenvorbereitung Phosphataseinhibitoren enthält, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten.
• Für den Western-Blot-Nachweis sollten Sie in Betracht ziehen, Zellen vor der Lysatherstellung mit geeigneten Zytokinen (z.B. Prolaktin, IL-2 oder Wachstumsfaktoren) zu behandeln, um die STAT5A-Phosphorylierung zu induzieren.
• Optimieren Sie bei der Immunhistochemie (IHC-P) die Antigen-Retrieval- und Blockierungsbedingungen und validieren Sie die phospho-spezifische Färbung unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollgewebe.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Peptid-kompetitive Assay zur Bestätigung der Signalspezifität verwendet werden.
• Wie bei jedem phospho-spezifischen Antikörper sollten Sie die Leistung des Antikörpers in Ihrem spezifischen experimentellen System unter Verwendung bekannter phosphorylierter und nicht-phosphorylierter Proteinproben validieren.

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