Phospho-STAT3-S727 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, IHC-P, ELISA - P40763

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: STAT3-Funktion und -Lokalisierung

• STAT3 (Signaltransducer and Activator of Transcription 3), auch bekannt als Akutphasereaktionsfaktor (APRF), ist ein Mitglied der STAT-Proteinfamilie, die zelluläre Antworten auf Interleukine, KITLG/SCF, LEP und andere Wachstumsfaktoren vermittelt (PubMed:10688651, PubMed:11294841, PubMed:12359225). Verwandte Referenzen: PMID:10688651 PMID:11294841 PMID:12359225

• Nach Aktivierung rekrutiert er Coaktivatoren wie NCOA1 oder MED1 in die Promotorregion der Zielgene (PubMed:15653507, PubMed:16285960, PubMed:17344214). Verwandte Referenzen: PMID:15653507 PMID:16285960 PMID:17344214

• Kann zelluläre Antworten auf aktiviertes FGFR1, FGFR2, FGFR3 und FGFR4 vermitteln (PubMed:12873986). Verwandte Referenzen: PMID:12873986

• Bindet nach IL6-Stimulation an IL6-reaktive Elemente in den Promotoren von Akutphasen-Proteingenen (PubMed:12359225) und wird durch IL31 über IL31RA aktiviert (PubMed:15194700). Verwandte Referenzen: PMID:12359225 PMID:15194700

• Reguliert die Entzündungsantwort, indem es die Differenzierung naiver CD4+ T-Zellen in Th17- oder Treg-Zellen beeinflusst; Acetylierung fördert seine Transkriptionsaktivität und Zelldifferenzierung, während Deacetylierung und Oxidation von Lysinresten durch LOXL3 die Differenzierung hemmen (PubMed:28065600, PubMed:28262505). Verwandte Referenzen: PMID:28065600 PMID:28262505

• Beteiligt an der Regulierung des Zellzyklus durch Induktion der Expression von Schlüsselgenen für den Übergang von der G1- zur S-Phase, wie z. B. CCND1 (PubMed:17344214), und kann eine apoptotische Rolle spielen, indem es BIRC5 unter LEP-Aktivierung transaktiviert (PubMed:18242580). Verwandte Referenzen: PMID:17344214 PMID:18242580

• Zytoplasmatisches STAT3 unterdrückt die Makroautophagie durch Hemmung der EIF2AK2/PKR-Aktivität (PubMed:23084476). Verwandte Referenzen: PMID:23084476

• Wechselt zwischen Zytoplasma und Zellkern; spielt eine entscheidende Rolle in den basalen Betazellfunktionen (nach Homologie) und ist an der Onkostatin-M-vermittelten Signalübertragung durch Typ-I- und Typ-II-OSM-Rezeptorkomplexe beteiligt (PubMed:9188471). Verwandte Referenzen: PMID:9188471

• Wird in Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse exprimiert; auch in naiven CD4+ T-Zellen und T-Helfer-Th17-, Th1- und Th2-Subsets nachgewiesen (PubMed:31899195). Verwandte Referenzen: PMID:31899195

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Resten rund um Ser727 von humanem STAT3 entspricht; basierend auf der Sequenzhomologie wird erwartet, dass der Antikörper STAT3 spezifisch nur dann erkennt, wenn es an dieser Stelle phosphoryliert ist; eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird vorhergesagt.
• Für den Western Blot sollte ein Band um 88 kDa beobachtet werden; für die phospho-spezifische Erkennung ist möglicherweise eine Optimierung von Blockierung und Antikörperverdünnung erforderlich.
• Für IHC-P können Antigen-Retrieval-Protokolle und Fixierungsbedingungen die Erhaltung des Phospho-Epitops beeinflussen; eine Validierung mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen wird empfohlen.
• Für IP- und ELISA-Anwendungen sollte die Leistung im relevanten Proben-system überprüft werden, da die Bindung von Phospho-Antikörpern durch die Zusammensetzung des Lyse-Puffers und die Zugänglichkeit der Phosphostelle beeinflusst werden kann.
• Angesichts der Beteiligung von STAT3 an diversen Signalkaskaden sollten Sie erwägen, Zellen mit Phosphatasehemmern und geeigneten Zytokinstimulationen zu behandeln, um die Erkennnung der S727-Phosphorylierung zu verbessern.

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