Phospho-STAT1-Y701 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - P42224

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von STAT1

• Signaltransduktor und Transkriptionsaktivator, der zelluläre Antworten auf Interferone (IFN), Zytokin KITLG/SCF und andere Zytokine und Wachstumsfaktoren vermittelt. Spielt eine zentrale Rolle in JAK-STAT-Signalkaskaden. Verwandte Referenzen: PMID:12764129, PMID:12855578, PMID:15322115
• Nach Stimulation mit Typ-I-IFN (IFN-alpha/beta) wird STAT1 an Y701 durch JAK-Kinasen tyrosinphosphoryliert, dimerisiert mit STAT2 und IRF9 zum ISGF3-Komplex, der in den Zellkern transloziert und an ISRE-Elemente bindet, um interferonstimulierte Gene (ISGs) zu induzieren und einen antiviralen Zustand zu etablieren. Verwandte Referenzen: PMID:28753426, PMID:35568036
• Als Antwort auf Typ-II-IFN (IFN-gamma) bildet STAT1 ein Homodimer (GAF), das an GAS-Elemente bindet und die Transkription von Zielgenen antreibt. Tyrosin- und Serinphosphorylierungen sind für diese Aktivierung entscheidend. Verwandte Referenzen: PMID:8156998, PMID:26479788
• Wird durch KITLG/SCF-KIT-Signalgebung aktiviert, was seine Rolle über Interferone hinaus erweitert. Verwandte Referenzen: PMID:15526160
• Nimmt an FGFR-vermittelter Signalgebung teil, möglicherweise durch direkte Interaktion oder nachgeschaltete Effekte. Verwandte Referenzen: PMID:19088846
• Nach Endozytose von TLR4 wird STAT1 an Thr-749 durch IKBKB phosphoryliert, was die Transkription von ARID5A und IL12B fördert und angeborene Immunsignale mit inflammatorischer Genexpression verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:32209697
• Shuttelt zwischen Zytoplasma und Zellkern; der Kernimport wird streng durch den Phosphorylierungsstatus reguliert. Enthält eine konservierte SH2-Domäne und DNA-Bindungsdomäne, charakteristisch für STAT-Familienmitglieder.
• Wird auch mit intestinaler Immuntoleranz in Verbindung gebracht: assoziiert mit dem Gasdermin-D p13-Fragment, um die CIITA-Transkription und die Differenzierung von Tr1-Zellen zu fördern (durch Ähnlichkeit).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y701 des humanen STAT1; erwägen Sie die Verwendung einer nicht phosphorylierten Peptidkonkurrenz oder einer Phosphatasebehandlung, um die Phosphorylierungsspezifität in Ihren Assays zu bestätigen.
• Für den Western Blot läuft STAT1 bei etwa 87 kDa. Verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und validieren Sie die Banden unter reduzierenden Bedingungen.
• Bei ELISA-Anwendungen können direkte oder indirekte Detektionsformate getestet werden; die Beschichtung mit phosphoryliertem Peptid und die Detektion mit einem HRP-konjugierten Sekundärantikörper ist ein gängiger Ansatz.
• Da die STAT1-Aktivierung stimulusabhängig ist, behandeln Sie Zellen vor der Lyse mit Interferon (z. B. IFN-alpha oder IFN-gamma), um die Y701-Phosphorylierung für eine robuste Detektion zu induzieren.
• Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte ist dokumentiert; für andere Spezies alignieren Sie die Zielsequenz um Y701, um eine potenzielle Reaktivität zu bewerten.

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